技术背景

蛋白磷酸化酶2A（protein phosphatase 2A；PP2A；EC 3.1.3.16），又称为2型蛋白丝/*磷酸化酶，催化亚体，α异构体（type II protein serine/threonine phosphatase catalytic subunit，alpha isoform），是主要的丝/*磷酸化酶成员之一，从酵母到人类高度进化保留。其功能与细胞周期进程、DNA复制和转录、RNA剪切、转译等有关。PP2A的结构为异源三体，包括结构亚体、调节/目标亚体和催化亚体。PP2A的目标蛋白是肿瘤信号通路的蛋白分子，例如Raf，MEK，Akt等。基于特异性底物磷酸化多肽RKpTIRR，在抑制剂黑海绵酸（okadaic acid）存在与否的情况下，受到蛋白磷酸化酶2A的去磷酸化作用，释放出游离磷酸根，由*氨还原产生钼蓝显色反应后，在分光光度仪下（660nm波长）产生峰值的变化，由此测定黑海绵酸敏感性蛋白磷酸化酶2A（PP2A）的特异活性。