过表达慢病毒包装服务实验技术外包简介

慢病毒具有广泛的感染谱，可以有效感染分裂期和静止期的细胞，并且能够*稳定表达外源基因，因而成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、基因干扰以及活体动物实验中。

服务内容：慢病毒包装的基因涉及常规的蛋白编码基因及非编码基因，比如：miRNA、lncRNA以及circularRNA等的过表达及干扰的慢病毒包装服务。

慢病毒包装服务价格与周期

过表达慢病毒包装服务实验技术外包实验流程

a. 慢病毒过表达质粒载体的构建： 根据目的基因序列设计特异性扩增引物，采用高保真PCR技术从模板中调取目的基因CDS区连入核心载体。

b. 慢病毒干扰质粒载体的构建：合成目的基因的siRNA序列，退火成双链，然后连入慢病毒干扰质粒载体。

c. 非编码基因过载体构建：从模板中调取基因相应的miRNA前体, 然后连入慢病毒核心质粒（miRNA以基因组为模板，lncRNA和circularRNA根据需要可以用cDNA或基因组为模板）。

d. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化： 核心质粒和辅助质粒进行高纯度无内毒素抽提，共转染293T细胞，转染后8h 更换为*培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。

服务流程：

徕创客户须知

1、适用于在难以转染的细胞中进行的基因过表达或干扰研究，如原代神经细胞，干细胞，肿瘤细胞等；

2、适用于快速建立稳定表达的特定基因细胞株；

3、适用于In vivo 实验，包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射、活体动物的基因过表达或干扰等。

承诺

提供完整客观准确的实验报告。