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呕吐毒素的危害和*及快速定量检测方法呕吐毒素主要成分为DON(deoxynivalenol),是一种单端孢霉烯族的化合物,主要是来自于镰刀菌属,包括为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌。
呕吐毒素DON对于粮食谷物类的污染状况与产生毒素的菌株、温度、湿度、通风、日照等因素有关。主要污染物有小麦、大麦、燕麦、玉米等谷类作物;面包、饼干、麦制点心等粮食制品;动物的奶、蛋中等。小麦赤霉病主要分布在潮湿温带地区,我国大部分地区又处于这一地带,所以造成呕吐毒素DON污染较严重,而在多雨年份地区污染状况则更为严重,这给饲料企业以及养殖业主带来了很大的损失,人们食用含有呕吐毒素的食物会危害到人体健康。
一、呕吐毒素的理化特性:
呕吐毒素(DON),又被称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮,是一种单端孢霉烯的族化合物。而单端孢霉烯族毒素一共有150多种,呕吐毒素(DON)是单端孢霉烯族毒素中重要的一种毒素。
呕吐毒素DON纯品是一种白色针状结晶,其结构环为四环的倍半萜,分子量为296.3,熔点为151 ~153℃(醋酸乙基石油),呕吐毒素DON易溶于极性的溶剂:如水、甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、丙酮等,不溶于正已烷、丁醇、石油醚等。
呕吐毒素DON耐热,一般不会在加工、储存以及烹调过程中被破坏;耐藏力强,病麦经四年贮藏,其中的呕吐毒素DON仍能保留其原有的毒性,这使得在实验室条件下可*贮存保持毒力不变的样本;在弱酸中部不分解,但在加碱或高压处理下,可破坏部分含有呕吐毒素的谷物类加工产品;在甲醇中不稳定,22天后可被转化为其它产物。
二、呕吐毒素对动物和人的危害:
细胞毒性:(1)通过对磷脂双层的渗透作用,作用于亚细胞水平层面;(2)通过细胞膜之间的相互作用;(3)通过自由基介导脂质的过氧化作用。
免疫毒性:(1)可以形成对病原体免疫应答的抑制;(2)可以造成自身免疫反应的诱发。
三致作用:可能具有致癌、致畸、致突变作用,是一种潜在的隐形的致癌物质。
2.1 呕吐毒素对动物的危害
单端孢霉烯族毒素都有可能引起鸭、猫、狗、猪、鸽子等不同动物的呕吐症状,动物毒力学的一项试验研究表明:不同畜种的动物对呕吐毒素DON的敏感程度按顺序是:猪>小鼠>大鼠>家禽和反刍动物。
对呕吐毒素为敏感的动物是猪,尤其敏感的是断奶仔猪,猪对呕吐毒素DON的敏感程度约为其他动物的100-200倍。饲料中0.3~0.5mg/kg的毒素就会引起猪拒食、生长能力下降以及对传染病的抵抗能力下降,饲料中含1mg/kg以上的呕吐毒素就可能引起猪拒食、嗜睡、生长严重受阻、体增重减慢、免疫机能减退、丧失肌肉协调性以及呕吐等症状。对生长较为肥育的猪而言,含有14mg/kg呕吐毒素的饲料饲喂后10~20min即会出现呕吐、不正常的焦虑和磨牙现象,呕吐现象仅发生在第1天。而且呕吐毒素含量在0~14mg/kg的试验中,饲粮中每增加1mg/kg呕吐毒素,生长肥育猪的采食量减少6%,在含毒量10mg/kg以上即*拒食。奶牛的健康状况、产奶量、摄食量几乎不受影响,牛奶中也检测不到呕吐毒素DON及其脱氧产物。
呕吐毒素的急性毒性与动物的种属、年龄、性别、染毒途径有关,雄性动物对毒素比较敏感。急性中毒的动物主要表现为站立不稳、反应迟钝、竖毛、食欲下降、呕吐等,还可引起动物的拒食反应,低剂量摄入会造成食欲下降、生长缓慢、发育不良和病死率升高等现象;大量或*摄入会发生急性中毒、呕吐、直肠出血和腹泻,与肠道炎症极其相似。呕吐毒素对动物机体毒性主要分为免疫毒性和细胞毒性。在很多物种上已经得到证实,呕吐毒素DON可以通过胎盘转移到胎儿。怀孕母猪感染呕吐毒素DON后在胎儿的血浆、肝和肾中均检测到呕吐毒素DON。
2.2 呕吐毒素对人类健康的危害
人类食用含有呕吐毒素的粮油食品后,会出现胃部不适、眩晕、腹胀、头痛、e心、呕吐,手足发麻、全身乏力、颜面潮红、以及食物中毒性白细胞缺乏症等症状。症状较为严重者可见呼吸、脉搏、体温、血压波动,四肢发软、步态不稳,更为严重时损害造血系统造成死亡。
呕吐毒素主要通过胃肠道吸收,jing血液循环进入肝脏代谢后经肾脏随尿液排出,容易造成对各个器官的普遍损伤。而且呕吐毒素在人体中的半衰期约为2~4h,代谢迅速,8h后就可能检测不到呕吐毒素和它的代谢物。
三、中国及主要国家对呕吐毒素的*
3.1、中国呕吐毒素* (饲料)
3.2欧盟呕吐毒素*(饲料)
3.3美国呕吐毒素*(饲料)
四、呕吐毒素常用检测方法
1、胶体金定性卡法:
是呕吐毒素简便的检测方法,检测不需要配套仪器,样品处理简单,五到十分钟就可以看到检测结果。可以根据G、T线,初步确定所测样本毒素含量范围,但不能给出具体数值。价格低、没有国标支持,适合企业初检使用。
2、酶联免疫吸附测定法:
依据该方法开发出来的呕吐毒素检测试剂盒,可以半定量的检测样品中呕吐毒素的含量,目前国产试剂盒大量上市,价格适中,有国标支持,适合中小型企业质量控制,或者作为产品初步质量控制。
3、免疫亲和柱为分离手段:用高效液相色谱仪作为检测工具的分析方法。该项技术灵敏度高,测定范围广泛,采用单克隆免疫技术,可以*性地将呕吐毒素和其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高,正确性和可靠性强,有国标支持。检测成本高,仪器维护成本高。一般作为检测机构终端判定方法,也有大型企业作为产品质量卫生指标控制方法。
4、胶体金定量分析卡法:是深圳市芬析仪器制造有限公司推出的光谱扫描吸峰方法,灵敏度高、结果可靠,可以和亲和柱方法相媲美,检测价格适中;有行业标准支持。适合中大型企业作为产品质量卫生指标控制。
5、液相或气相串联质谱法:一般作为实验室实验检验方法,主要作为研究或者国家部门对毒素情况监测、风险评估。