人白细胞介素1β
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人白细胞介素1β

人白细胞介素1β

参考价: ¥588~¥1980

具体成交价以合同协议为准
2024-03-13 17:18:57
503
属性:
规格:5ug、10ug、50ug;产品别名:(IL-1β)重组蛋白;货号:BJ-X2550;用途:仅用于科研、不得用于临床;
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规格:
5ug;10ug; 50ug;
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产品属性
规格
5ug、10ug、50ug
产品别名
(IL-1β)重组蛋白
货号
BJ-X2550
用途
仅用于科研、不得用于临床
关闭
人白细胞介素1β

参考价: ¥588~¥1980

5ug 588元 15 瓶可售
10ug 980元 15 瓶可售
50ug 1980元 15 瓶可售
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

人白细胞介素

产品简介:

产品名称

规格

货号

人白细胞介素

5ug、10ug、50ug

BJ-X2550

细胞培养具体步骤:

一、常用设备

1. 准备室的设备

单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。

2. 培养室的设备

液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)。

3. 必须放在无菌间的设备

离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。

二、无菌操作

(一)无菌室的灭菌

1.定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或新洁尔灭或0.5%过氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照射。

3.实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟。

4.实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。

细胞培养方法:

01 原代培养操作步骤

原代培养的操作步骤为:取材分离培养。

1)取材:对于不同的组织有不同的取材方法,但均应保持材料的新鲜及严格无菌。

5.png

细胞传代培养操作步骤如下:

1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。

2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。

3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。

4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。

5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min

6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。

7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。

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注意事项:

1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。

2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。

4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不,收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。

5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。

6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。

 


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