病毒RNA提取试剂盒
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病毒RNA提取试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-05-23 16:24:19
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编号 :BJ-F0163219;
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BJ-F0163219
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
中文名称:病毒RNA提取试剂盒
英文名称:RNAtiqu Virus RNA Extraction Kit
产品规格:50
发货周期:13
产品货号:BJ-F0163219
产品介绍:

本试剂盒采用可以特异性结合病毒RNA的吸附柱和*的缓冲液系统,适用于从血清、血浆、尿液、脑脊液等无细胞体液及细胞培养上清液中分离病毒RNA。病毒RNA特异性地结合到硅基质膜上,而污染物则流过该膜。通过两次高效洗涤*去除蛋白质等杂质,然后用无RNase的水或试剂盒提供的RNase-Free   Water洗脱高纯度的病毒RNA。由本试剂盒提取的病毒RNA可直接用于RT-PCRReal-time RT-PCR和印迹分析等实验。

自备试剂:无水乙醇,0.9% NaCl

实验前准备及重要注意事项:

1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。

2、预防RNase污染,应注意以下几方面:

1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。

2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10分钟,用水*冲洗后高压灭菌。

3)配制溶液应使用无RNase的水。

4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。

3、血清或血浆避免反复冻融导致蛋白变性或产生沉淀,减少病毒滴度进而影响提取病毒核酸的产量。

4、次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。

5Buffer GL如果产生沉淀,可在56℃加热使其溶解后室温放置。

6、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。

使用方法:本产品仅用于科研
注意:标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)
鼻拭子的采集:将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集:用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中,弃去拭子尾部,拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封;每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上,连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内,拧紧盖,在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本,可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力,内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱),放入冰排,然后以柔软物质填充,并密封,由专人(2)运送,不得邮寄,最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达,则应尽快在-70以下保存。无-70条件的,需在4冰箱短时间暂存,并尽快联系递送标本。流感病毒在-20-40时不稳定,故长期保存最好在-70温度以下进行。

注意事项:
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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(0.105mg/ml)  Phenthoate solution  质量规格:0.105mg/ml FITC标记二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

敌稗标准溶液(0.100mg/ml)  Propanil solution  质量规格:0.100mg/ml Mouseserine/threonineproteinkinase,STKelisa小鼠丝/苏蛋酸酶(STK)elisa规格:96T/48T

伏杀硫磷  Phosalone  质量规格:分析标准品 小鼠跨膜蛋白27(TMEM27)elisa ,英文名: TMEM27 ELISA Kit
操作规程
1
、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升500010000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2
.加入适当浓度的010μL 受试化合物。
3
、将96孔板在37,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4
、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5
、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6
、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7
、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8
、结果分析
 a
、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD×100
 b
、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)T/C = 10%时的药物浓度(IC90)


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