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本公司提供的都是活性的新鲜细胞,具体详情可,来电可享受*!
细胞名称 人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]*
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 NCI-H460细胞株从一位大细胞肺癌患者的胸水中建立。 细胞表达的p53 mRNA易于检测,其水平与正常肺细胞相当,未表现出DNA总体结构异常。 角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性,神经丝三联体蛋白阴性。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(139+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:13;D16S539:9;D18S51:13,15;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:21,23;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17
同工酶
染色体
使用权限 A类
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]*操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]*注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]*美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上zui大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
大鼠Ⅵ型胶原α1(COL6α1)ELISA试剂盒 ,英文名: COL6α1 ELISA Kit
Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) ELISA Kit 人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒
Goatmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/OLAELISAKit 山羊主要组织相容性复合体(MHC/OLA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforC3aELISAKit大鼠补体片断3a规格:48T/96T
细菌钙转试剂盒20次
rabbitTestoterone,ISAKit兔子睾同(T)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA试剂盒 ,英文名: ALOX12 ELISA Kit
人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA检测试剂盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 96T/48T
大鼠维生素B12(VB12)免疫试剂盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit
英文名称RatCA199ELISAKit大鼠胃肠癌标志物(CA199)规格:96T/48T
烘培食物尿素比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitHO-2人血红素氧合酶2规格:48T/96T
人胃泌素(Gasin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫试剂盒 Pig secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit
HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISAKIT 人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISA试剂盒人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织组蛋白脱乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanFibronectin,FNELISAKit人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人鼻咽癌细胞;CNE-2Z
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照)
MEG-01 人成巨核细胞白血病细胞
MSTO-211H人肺癌细胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
MIF Protein Human 重组人 MIF / GLIF 蛋白 (His 标签)
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] 人支气管成纤维细胞*培养基 100mL
人鼻咽癌细胞;CNE-2Z
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人细胞裂解液 (阳性对照)
MEG-01 人成巨核细胞白血病细胞
MSTO-211H人肺癌细胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
MIF Protein Human 重组人 MIF / GLIF 蛋白 (His 标签)
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] 人支气管成纤维细胞*培养基 100mL
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]*人内壳细胞(HHirSC)( 5×105 )
人癌细胞;MCF 7B
CL-0447SW 1353(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人细胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
P815 小鼠肥大细胞癌细胞
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人细胞裂解液 (阳性对照)