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注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育详细描述:
产品名称:嗜人锥蝇探针法PCR荧光定量检测试剂盒
英文名称:Cochliomyia hominivorax
货号:BJ-P9438
规格:50T
分类:荧光定量PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用方法: 产品仅用于科研
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
小鼠血清总补体(CH50)ELISAKit Methyltestosterone 中文名:甲基 分子式:C20H30O2 度:98.0%
小鼠血清淀粉样蛋白elisa试剂盒 小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒、小鼠血清淀粉样蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Metronidazole 443-48-1 中文名: 分子式:C6H9N3O3
小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒 Minisecolide C 1967030-77-8 中文名: 分子式:C28H34O7
小鼠血清淀粉样蛋白(mouse SAA) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Gliquidone 33342-05-1 中文名:格 分子式:C27H33N3O6S
小鼠血清(NO)ELISA试剂盒 Minisecolide C 1967030-77-8 中文名: 分子式:C28H34O7 度:% 关键词:
O甲基白杨素 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒 ,英文名: PF4 ELISA Kit
O甲基杧果苷 HPLC≥98% 20mg 兔子γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
O甲基莫诺苷 HPLC≥98% 20mg 犬半胱蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)试剂盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
β羟基 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanPlaceaGrowthFactor,PIGFELISAkit人肽盘生长因子(PLGF)规格:96T/48T
氨基甲基 HPLC≥98% 20mg 大米淀粉生物萃取试剂盒20
表 HPLC≥98% 20mg Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA试剂盒大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲氧基 HPLC≥98% 20mg 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒 ,英文名: PF-3 ELISA Kit
木糖苷脱乙酰基 HPLC≥40% 20mg 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA检测试剂盒MouseC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T
木糖基 HPLC≥98% 20mg 人11(KLK 11)试剂盒 Human Kallikrein 11,KLK 11 ELISA Kit
羟基,二甲氧基黄烷酮 HPLC≥98% 20mg Ratcalcineurin,CaNELISAKit大鼠钙调0酸酶(CaN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞半胱(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒
通用型半胱(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒
饮料精(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
酒类精(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
植物精(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
嗜人锥蝇探针法PCR荧光定量检测试剂盒真菌/酵母黑色素含量比色法定量检测试剂盒
植物黑色素含量比色法定量检测试剂盒
细胞总酶连续循环比色法定量检测试剂盒
组织总酶连续循环比色法定量检测试剂盒
血液总酶连续循环比色法定量检测试剂盒
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建