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标记抗体的原理:
目前较为常用的标记抗体的方法,FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶,性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下,FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上最多能标记15~20个FITC分子,被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力,在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光,通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析,从而对抗原进行定性、定位或定量。
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 磷酸化内收蛋白抗体价格 |
英文名称 | phospho-alpha Adducin (Thr445) |
货号 | BJ-K96540 |
抗体的种类:
抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋巴细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对免疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
(1) IgG:是血清中浓度的一类球蛋白,约占免疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免疫中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗细菌、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。
(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现最早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免疫作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染免疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。
(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有抗菌和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止细菌或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部淋巴结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在细菌表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗细菌和病毒的感染中几乎无作用。多克隆抗体制备过程:
蛋白抗原
↘抗原准备→兔、小鼠免疫→抗血清→抗体纯化 →鉴定(ELISA、WB、IHC)
多肽偶联 ↗ (抗原亲和纯化)
从细胞中提取出来的生物大分子是不纯净的,必须进一步分离纯化才能获得纯品。在生物大分子制备工作中,分离纯化是比较复杂和重要的一个环节。对于异类的物质,如提纯蛋白质和酶时混杂着核酸,提纯核酸时混杂着蛋白质或多糖,一般可用专一性酶水解、有机溶剂抽提、选择性分部沉淀等方法处理,小分子物质常在整个制备过程中多次液相与固相互相转化被分离或用透析方法除去。而对同类物质,如酶和杂蛋白,RNA和DNA以及不同结构的蛋白质、酶、核酸之间的分离,情况则复杂得多,主要应用的方法有电泳法、超速离心法、盐析法、有机溶剂沉淀法、吸附法、结晶法、电点沉淀法、柱层析法
抗原抗体反应影响因素:
(一)反应物自身的因素
5) 抗体:不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂.等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应.
6) 抗原:抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果.颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象.
(二)反应环境条件
7) 酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行.蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点.抗原抗体反应一般在pH6~9进行,有补体参与的反应pH为7.7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应.
8) 温度:在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速.一般为15℃~40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏.每种试验都有其*的最适反应温度要求.此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应.
9) 电解质:抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应.为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液
CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 细胞裂解液 (阳性对照) L-天冬酸100克
NCI-H345(悬浮) 小细胞肺癌基二茂铁 Ferrocenylamine,96% 1273-82-1 100MG 通用试剂
NCI-N87 [N87]胃癌细胞轻化 litxium hydridq 7280-67-8
脐动脉内皮细胞微量可调移液器P200shēng huà shì jì容量:5克
恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI] 前列腺成纤维细胞*培养基 100mLPH缓冲液 PH9.0(20℃)NA
大鼠皮肤肥大细胞*培养基 100mLFmoc-lle-OHN-芴甲氧羰基-L-异亮酸25克特,99%
COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞 Renal cell COS-7 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培养基+10%FBS草甘二1 Glyphosine,≥98.0% 2439-99-8 5G 通用试剂
IFNA2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 标签)拂泥缩 ≥97% FLUNISOLIDq 7736-96-6
K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞) 5×106cells/瓶×2 溶组织梭菌Closidium histolyticum本兰水溶,英文名或英文缩写:Aniline blue water soluble,级别:GR,99.5%,规格:25毫克
大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)9016-00-6聚二甲基硅氧烷Polydimetxylsiloxane
磷酸化内收蛋白抗体价格Promocell C-24300 Melanocyte Growth Medium M2, 色素细胞生长培养基M2型(即用型) 500ml盐酸阿利克仑Aliskiren 质量规格:美国进口
雪旺细胞培养基SCM-prf埃博霉素AEpothilone A质量规格:美国进口
KITLG Others Human SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1-萘乙酰精胺三盐酸1-Naphthylacetyl Spermine Tri质量规格:美国进口
表达SV40T和EBNA1的胚肾细胞;293ET精胺1酸盐六水合物Spermine Phosphate Hexahydrate质量规格:美国进口
YAC-1细胞,瘤细胞 结肠腺癌细胞,HT-29细胞 CM-H021前列腺平滑肌细胞*培养基100mLN-(4-羟基苯乙酰)-精胺N-(4-Hydroxyphenylacetyl)-spermine质量规格:美国进口