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甲型H1N1流感病毒(2009)检测试剂盒
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¥3288订购信息:
产品名称:诺如病毒GⅡ型RNA核酸检测试剂盒
规格:48T
编号:BH-P97197
分类:恒温荧光法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
2BS细胞,胚肺细胞 前列腺癌细胞,VLcop细胞 肾小管上皮细胞;HKC罗汉果皂苷V()Mogroside ⅤHPLC≥98%,
猕猴皮肤细胞;MMS7络塞维()RosavinHPLC≥98%,
TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 细胞裂解液 (阳性对照) 落新妇苷()AstilbinHPLC≥98%,
小细胞肺癌;NCI-H2227马钱苷()LoganinHPLC≥98%,
KIT Others Human KIT / c-KIT / CD117 (aa 540-972) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马钱苷酸()Loganic acidHPLC≥98%,
hMo-PB single 类外周血单核细胞团块单一来源,超 > 1 mio.cells 小脑颗粒细胞RNAHCGC miRNA5 μg钼酸钠二水(AR)>99%,AR molybdate
CM-M018小鼠颌下腺上皮细胞*培养基100mL硅酸镁(高)>98%Magnesium silicate
COLEC11 Others Mouse 小鼠 CL-K1 / COLEC11 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 钙羧酸指示剂(Indicator)IndicatorCalconcarboxylic acid
滋养层细胞培养基TM红INDChlorophenol red
猴源细胞 T细胞白血病,6T-CEM细胞 COLO-320(结肠腺癌细胞)钙镁试剂INDCalmagite
诺如病毒GⅡ型RNA核酸检测试剂盒肾动脉内皮细胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)阿格列汀;阿洛利停>98%,BRAlogliptin(SYR-322)
NP Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 莪术1醇()HPLC≥98%,Curcumenol
小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFPBYL719>98%,选择性的PI3Kα抑制剂BYL-719
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 色素瘤细胞,B16细胞 Pr-HNV8细胞,菜青虫卵巢细胞BYL719>98%,选择性的PI3Kα抑制剂BYL-719
293来源病毒包装细胞;ΦAVRT752271>98%,盐酸盐形式,蛋白激酶抑制剂VRT-752271.HCl
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。