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甲型H1N1流感病毒(2009)检测试剂盒
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¥3288订购信息:
产品名称:Cry1A(b/c)基因核酸检测试剂盒
规格:48T 0.2PCR管
编号:BH-P97048
分类:PCR-荧光探针法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
CNE-1 高分化鼻咽癌细胞参皂苷Rb1()Ginsenoside Rb1HPLC≥98%,
P9-EGFP-puro小鼠骨髓基质细胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S参皂苷Rb2()Ginsenoside Rb2HPLC≥98%,
CD40LG Protein Canine 重组狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)参皂苷Rb3()Ginsenoside Rb3HPLC≥98%,
心肌细胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 Mouse参皂苷Rc()Ginsenoside RcHPLC≥98%,
小鼠T细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)参皂苷Rd()Ginsenoside RdHPLC≥98%,
TNFRSF21 Others Mouse 小鼠 DR6 / TNFRSF21 细胞裂解液 (阳性对照) 毒死蜱()分析,99%Chlorpyrifos
CM-H093颅盖造骨细胞*培养基100mL灭蝇胺标准溶液(10μg/ml,u=2%)10μg/ml,u=2%Cyromazin solution
LILRB1 Others Human LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 细胞裂解液 (阳性对照) 多菌灵(分析,99%)分析,99%Carbendazim
直肠平滑肌细胞HRSMC(分析,98%)分析,98%Carbaryl
Ca Ski细胞,小肠颈部表皮样癌细胞 癌细胞,ZR75-1细胞 狗间充质干细胞-脂肪DMSC-ad盐酸水苏碱()分析Stachydrine
Cry1A(b/c)基因核酸检测试剂盒山羊肾上皮样细胞;DG-K1N,N-二去甲基盐酸曲美布汀-d5美国进口N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5
CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N,N-二去甲基盐酸曲美布汀美国进口N,N-Didesmethyl Trimebutine
腮腺细胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)N-去甲基盐酸曲美布汀美国进口N-Demethyl Trimebutine
高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd 正常皮肤细胞,TE 353.Sk细胞 HO-8910(卵巢癌细胞)柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸美国进口Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide
神经胶质细胞瘤细胞;U251N-甲酰伐伦克林美国进口N-Formyl Varenicline