订购信息：
 产品名称：NPTII基因核酸检测试剂盒
规格：48T  0.2PCR管
编号：BH-P97040
分类：PCR-荧光探针法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
CTSC Others Human  CTSC / DPPI 细胞裂解液 (阳性对照) 隐绿原酸()Cryptochlorogenic acidHPLC≥98%，

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1鹰嘴豆芽素A()Biochanin AHPLC≥98%，

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 细胞裂解液 (阳性对照) 鹰嘴豆芽素ABiochanin A>98%,BR

Jurkat(悬浮) 急性T细胞白血病柚皮苷,川陈皮素NaringinHPLC≥98%，

PC-3前列腺癌细胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培养基+10%FBS羽扇豆醇（）LupeolHPLC≥98%，
胰腺导管上皮细胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)8-氟-6-甲氧基莫西沙星美国进口8-Fluoro-6-methoxy Moxifloxacin

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑马鱼 EFNB2A / Ephrin B2a 细胞裂解液 (阳性对照) (R)-酰基-β-D-葡萄糖苷酸苄基酯美国进口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12](S)-酰基-β-D-葡萄糖苷酸苄基酯美国进口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester

MRC-5细胞，胚肺细胞 大鼠肺上皮Ⅱ型细胞,RLE-6TN细胞 T-109B弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL(R)-O-去甲基美国进口(R)-O-Desmethyl Naproxen

SK-OV-3(卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2莫沙必利美国进口Mosapride
NPTII基因核酸检测试剂盒CM-R072大鼠肾管状上皮细胞*培养基100mL硫代基脲25克

小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH2 小鼠肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL2,2,2-三拂醇 2,2,2-Trifluoroqthcnol; 72-89-8

MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse钾25克RT

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 细胞裂解液 (阳性对照) 羟脯酸测试盒25支/包

急性T细胞白血病细胞;Jurkat, Clone E6-110203-08-43,5-二录3,5-Dichloro
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。