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可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
6.收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。
7.收集标本时,应该做好防护措施(比如戴手套,口罩,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。
8.样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。
【标本处理办法】
1.血清:将采集的全血静置冰箱4℃过夜,然后1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
2.血浆:用EDTA,枸橼酸钠,肝素等作为抗凝剂,加入血液混匀后,1000-3000rpm离
心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)
保存。
3.组织匀浆:切取组织块,0.01MPBS中过洗一次;按照1G组织加入5-10ml组织蛋白萃取试剂的比例,在冰水中匀浆。匀浆完成后,5000-10000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
4.细胞培养上清:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
5.尿液,腹水,脑脊液等:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃3-6个月)保存。
注:样品稀释的一般原则
用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的 检测范围。样品的稀释应有详细记录。
【注意事项】
1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。
2.浓缩生物素化大鼠β-TPS抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,使结晶*溶解后再配制洗涤液。
4.测试过程中,大鼠β-TPS冻干标准品为一次性使用,不得分装。因其浓度较低,溶解两小时候后,会迅速失活。
5.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
6.配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要, 使用微量振荡器(使用低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。
7.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。
8.酶免试验中大鼠β-TPS标准品和样本检测时建议作复孔。
9.将不用的微孔板放进原铝箔袋中,