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线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)
产品描述:
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-10聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-10不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-10为单体,可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。JC-10单体的大激发波长为515nm,大发射波长为529nm;JC-10聚合物的大激发波长为585nm,大发射波长为590nm。实际观察时,使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
使用方法
工作液配制:
1)JC-10粉末(1 mg):直接加0.5 ml DMSO到粉末内,室温颠倒混匀使其充分溶解,即得到2 mg/ml(约3 mM)的储存液。溶液分装成小量储存于-20℃,避光干燥,避免反复冻融。
2)JC-10储存液(1mg in DMSO):本品是JC-10的DMSO储存液,浓度为2 mg/ml(约3 mM)。使用者需要根据单次用量来分装,-20℃避光干燥,避免反复冻融。
3)工作液配制(现配现用):将冻存的储存液置于室温充分融化,之后用HHBS(1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0)或其他缓冲液(pH 7-8,含0.02% Pluronic® F-127)配制成10-30 µM 1×工作液。涡旋混匀。
注:对于某些细胞,在pH 8情况下可能会阻止JC-10渗透入细胞。