鸡异刺线虫PCR试剂盒一种用于实时荧光定量PCR，即qPCR (Quantitative PCR)或real-time PCR的高品质预混液，主要用于cDNA和基因组DNA等的特异性超高灵敏度定量检测。
BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX)使用SYBR Green I作为染料。SYBR Green I是一种结合于双链DNA(double-strand DNA, dsDNA)双螺旋小沟区域的绿色荧光染料。SYBR Green I在游离状态下的荧光比较微弱，一旦与双链DNA结合后，其荧光会大大增强。这样通过检测荧光强弱就可以定量检测PCR过程中扩增产生的双链DNA的数量。
本产品使用的BeyoFast™ Taq DNA Polymerase是一种与抗体结合的高品质热启动酶，能够实现便捷高效的热启动。BeyoFast™ Taq DNA Polymerase中的Taq酶与抗Taq酶的单克隆抗体相互结合，从而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性，这样可以有效避免在低温条件下由引物和模板DNA非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。在PCR反应的预变性步骤中抗体会被加热失活，这样可以确保仅在预变性后才会把Taq酶的活性释放出来，预变性之前不会发生DNA聚合反应，从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。
本产品包含了BeyoFast™ Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料、稳定剂和镁离子等所有的通用组分，使操作更简单、使用更便捷。用户只需自备引物、样品DNA和去离子水即可。
鸡异刺线虫PCR试剂盒含高浓度ROX，适用于需高浓度ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。ROX的作用是用于校正与PCR无关的荧光波动，从而大限度减少孔间差异。这种差异可能由多种因素引起，如移液误差及样品蒸发等。不同的荧光定量PCR仪对ROX的要求不同，请根据实际所用仪器选择含高浓度ROX (High ROX)、低浓度ROX (Low ROX)或不含ROX的BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X)。通常含高浓度ROX的BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX)也可以用于不需要ROX或需要低浓度ROX的荧光定量PCR仪。常用仪器所需ROX类型请参考如下表格。
添加ROX类型 适用PCR仪
不需添加 Bio-Rad: CFX384, CFX96,MiniOpticon, iCycler IQ, MyiQ and iQ5;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex and realplex2 s;
Qiagen/Corbett Rotor-Gene: 6000;
Roche: LightCycler 480; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR
Low ROX ABI: 7500(Fast), ViiA 7, QuantStudio 6 and 7 Flex Systems;
Stratagene: Mx3000P, Mx3005P and Mx4000;
Qiagen/Corbett Rotor-Gene: 3000;
Bio-Rad/MJ: Chromo4, Opticon 2 and Opticon
High ROX ABI GeneAmp 5700; ABI PRISM 7000, 7700; ABI 7300, 7900HT(Fast);
ABI StepOne(Plus)
本产品如果用于常规的96孔板qPCR检测(建议反应体系为20μl)，每毫升本产品可以进行100次检测；如果用于常规的384孔板qPCR检测(建议反应体系为10μl)，每毫升本产品可以进行200次检测。
包装清单：
产品编号 产品名称 包装
D7265-1ml BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) 1ml
D7265-5ml BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) 1ml×5
D7265-25ml BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) 1ml×25
— 说明书 1份
保存条件：
-20℃避光保存，一年有效； 4℃避光保存，一个月内有效。尽量避免反复冻融。
注意事项：
使用前需确保整管试剂*融化，上下颠倒轻轻混匀后使用。混匀过程中尽量避免产生气泡。
注意引物退火温度，当退火温度<60℃时，推荐使用三步法PCR扩增。
本产品中含有SYBR Green I荧光染料，保存本产品或设置PCR反应时应避免强光照射，以尽量避免荧光淬灭问题。
对于超过350bp或者高GC含量的扩增片段，建议增加延伸时间至60秒或者采用三步法以提高扩增效率。
经测试，本产品反复冻融10次对使用效果无显著影响。但仍需尽量避免反复冻融本产品，反复冻融可能使产品性能下降。
qPCR检测是超高灵敏度的检测，PCR反应设置区域需尽量避免各种可能的待扩增产物的污染。PCR产物宜密封后丢弃，以避免超高浓度的PCR产物污染实验环境。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。