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一、ELISA试剂盒实验操作步骤包括:从包被,封闭,加样,洗涤,加显色底物,终止液加入,到读书操作,还有标准曲线制作等详尽的操作说明。
我公司主营如下:
免疫组化试剂盒,Elisa试剂盒:大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,犬Elisa试剂盒,鱼Elisa试剂盒,鸡Elisa试剂盒,牛Elisa试剂盒、其他动物类Elisa试剂盒、植物Elisa试剂盒、分子生物学试剂盒、 细胞凋亡试剂盒。
二、大鼠维生素D3(VD3)ELISA Kit试剂盒常见问题分析
2.1、ELISA试剂盒用户:为什么96T 的试剂盒只能检测85个样本,测双标准有什么好处?
博研生物解答:去掉一个空白和10个标准孔,96T 只能可检测85个样本。双标准对照会比单标准测的更加精确。
2.2、ELISA试剂盒用户:elisa试剂盒不知道浓度怎么办?
博研生物解答:每个试剂盒都是有对应的检测范围,比如试剂盒的范围50-1800Pg/ml ,如果样本高于这个检测范围就需要稀释,如果低于这个检测范围那就测不出来了。实验前可以先做个预实验摸索下检测范围。
2.3、ELISA试剂盒用户:ELISA试剂盒用什么仪器 对仪器有要求吗?
博研生物解答: ELISA试剂盒检测是配套酶标仪的,对酶标仪没有要求。
2.4、ELISA试剂盒用户:我有98个样本需要多少用几个盒子?
博研生物解答:我们试剂盒是 48T 96T 两种规格 可以分别检测 37 85个样本,你需要一个 48T和一个96T 盒子。
三、试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
试剂盒自备材料
1)蒸馏水。
2)加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振荡器及磁力搅拌器等。
四、注意事项:
◆标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
注●●公司经营的产品均为科研实验用,不可用于临床应用。
安全性
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
五、大鼠维生素D3(VD3)ELISA Kit试剂盒包含从基因组提取到扩增的所有试剂,优势如下:
1.快速提取:15分钟快速基因组DNA提取,无需组织裂解试剂,实验过程无需调pH值、离心;
2.快速分型扩增:45分钟快速高效扩增;
3.扩增试剂:分热启动型和非热启动型两种,含有染料,扩增后可直接电泳;
4.减少繁琐步骤,降低污染风险;
5.高通量操作:可在PCR仪上批量处理样本;
6.扩增产物末端加A,且可进行下游酶切、测序等。
特点:
(1)、*试剂——高效性、灵敏性、特异性
(2)、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
(3)、*的优化方案——回收利用率高、可靠性强
(4)、适用范围——适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
(5)、可检测指标齐全——生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
(6)、节省实验经费