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人麦考酚酸(MPA)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人(MPA)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
[实验原理]
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人(MPA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人(MPA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
[说明]
1.zui终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。
2.不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。
3.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到*的检测结果。
4.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
5.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
6.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
7.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
在实际操作中,除了挑选优良试剂外,有必要严厉依照操作过程进行操作,一起作好室内质控、室间质评,以谨慎的工作作风检查每一份标本,才干确保检查质量。ELISA试剂盒如今国内已有适当数量的单位具有全自动酶标仪,这关于完成ELISA规范化检查、进步检查质量起到了重要作用。
人麦考酚酸(MPA)ELISA试剂盒实验中遇到的问题解答
一、洗板
也许因素:
1) 选用手艺洗板,孔与孔之间液体穿插。 2) 选用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,致使洗板不*;洗板针阻塞,抽吸不*;洗板不畅,致使洗板作用差。 3) 反响板过多形成洗板等待时刻长。
解决办法:
1) 确保洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(挑选洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干; 2) 合理安排,或多用几台洗板机。
二、显色
ELISA试剂盒也许因素:
1) 显色剂制造后放置时刻过长或运用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅起孔外形成液体回流。
解决办法: 1) 显色剂尽量在临用前制造,坚持不bi过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必; 2) 加样时坚持显色剂不外流; 3) A、B液应防止触摸金属器械。
三、停止
也许因素如加停止液时发生较多气泡,致使假阳性添加。所以在加停止液时应防止发生气泡。
四、读板
ELISA试剂盒如读板时板底不清洗等。应确保酶标板清洗。所以在全部操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸; 尽也许完成ELISA检查规范自动化,有用进步检查质量。
[注意事项]
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。