产品简介：

Rapamycin（雷帕霉素），又称为Sirolimus和AY22989，是一种抗真菌和免疫抑制剂，特异性抑制mTOR蛋白（IC50约为0.1 nM）。Rapamycin与细胞内受体FKBP-12结合形成复合物后，直接作用于mTOR中的FRB（FKBP-12-rapamycin binding）结构域从而抑制蛋白活性。Rapamycin选择性抑制IL-2诱导的p70 S6激酶磷酸化与功能活化，也可以促使4E-BP1/PHAS1去磷酸，从而加强与eIF4E的结合并使之失活。Rapamycin能够阻断蛋白合成，诱导细胞周期停滞在G1期。不同于FK506和其他免疫抑制剂，Rapamycin以非凋亡的方式阻断活化T细胞增殖治疗器官或骨髓移植中发生的排斥反应，比传统治疗方法副作用更少。

产品性质

英文别名（English Synonym）：AY 22989, Sirolimus, RAPA, NSC 226080, Rapamune®

化学名（Chemical Name）：(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-

9, 10, 12, 13, 14, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 32, 33, 34, 34a-Hexadecahydro-9,27- dihydroxy-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl]-1-methylethyl]- 10,21-dimethoxy-6,8,12,14,20,26-hexamethyl-23,27-epoxy-3H- pyrido[2,1-c][1,4]oxaazacyclohentriacontine-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-pentone

靶点（Target）：mTOR

CAS 号（CAS NO.）：53123-88-9

分子式（Molecular Formula）：C51H79NO13

分子量（Molecular Weight）：914.17

外观（Appearance）：白色固体

纯度（Purity）：＞99%

溶解性（Solubility）：溶于DMSO(50 mg/ml)，乙醇(50 mg/ml)

运输与保存方法

冰袋运输。粉末直接保存于-20 ºC，有效期2年。溶于DMSO、乙醇。建议分装后-20ºC避光保存，避免反复冻存，至少可存放6个月。

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In Vitro：雷帕霉素抑制HEK293细胞内源性mTOR活性，IC50为0.1 nM，比iRap和AP21967更有效，IC50分别为5 nM和10 nM [1]。 雷帕霉素通过诱导自噬发挥其对恶性神经胶质瘤细胞的抗肿瘤作用，并且表明在恶性神经胶质瘤细胞中PI3K / Akt信号传导途径的破坏可以极大地增强mTOR抑制剂的有效性。 雷帕霉素以剂量依赖性方式抑制所有三种细胞系中的细胞活力，但它们的敏感性变化。 T98G，U87-MG和U373-MG细胞的IC50水平分别为2 nM，1μM和>25μM[3]。

In Vivo：雷帕霉素（i.p，1.5 mg / kg）治疗几乎*可以防止7天和14天跖肌重量和纤维大小的肥大增加[4]。 每天用雷帕霉素（2mg / kg体重，腹膜内注射）治疗WT或LS / +小鼠4周，然后每周注射相同剂量另外4周。 雷帕霉素处理的LS / +小鼠心脏的异常胎儿基因表达谱显着逆转[5]。

Kinase Assay：将HEK293细胞以每孔2-2.5×10 5个细胞接种于12孔板中，仅在DMEM中血清饥饿24小时。 将细胞模拟处理或用雷帕霉素（0.05-50nM），iRap（0.5-500nM）或AP21967（0.5-500nM）在37℃处理15分钟。 在37℃下将血清加至终浓度为20％，持续30分钟。 裂解细胞，通过SDS-PAGE分离细胞裂解物。 将分离的蛋白质转移至PVDF膜，并用针对p70 S6激酶的Thr389的磷酸特异性一抗进行免疫印迹。 使用ImageQuant和KaleidaGraph [1]分析数据。

仅供参考。

Cell Assay：HL-60，NB4，U937，KG-1和K562细胞常规传代于RPMI-1640中，补充有10％热灭活的FBS，2 mM L-guanxianan，50 U / mLqingmeisu和50μg/ mLlianmeisu。 在37°C下，5％CO2加湿的气氛。 对于实验，通过离心收获指数生长的细胞，并重悬于含有10％FBS的新鲜培养基中。 在各种浓度的DMSO或1μMATRA存在下，在BD Falcon六孔板中以2×10 5 / mL的初始细胞密度接种细胞。 在分化剂之前20分钟加入雷帕霉素（20nM）。 在第2天，向每个孔中加入0.3mL新鲜培养基。 通过台盼蓝排除法测定活细胞，并使用血细胞计数器进行定量[2]。

仅供参考。

Animal Administration：大鼠[4]

将雌性Sprague-Dawley大鼠（250-275g），成年雌性SD大鼠（225-250g）随机分配至治疗组或媒介物组，使得每组的平均起始体重相等。药物治疗开始于手术当天或14天停药后重新加载的*天。雷帕霉素每天一次通过腹膜内注射以1.5mg / kg的剂量递送，溶解在2％羧甲基纤维素中。 CsA每天一次通过皮下注射以15mg / kg的剂量递送，溶于10％甲醇和橄榄油中。 FK506每天一次通过皮下注射以3mg / kg的剂量递送，溶于10％乙醇，10％的cremophor和盐水中。

小鼠[5]

将雷帕霉素以20mg / mL的浓度溶解在乙醇中，过滤灭菌，以1mg / mL的浓度重悬浮于载体（0.25％PEG，0.25％吐温-80）中，并腹膜内注射。 （2mg / kg体重），每天持续4周或每天持续4周，然后每周注射另外4周。注射开始于8周（肥大发作前）或12周（指示确定肥大后），并在治疗4周后或治疗8周后评估小鼠，详见结果和图例。 。作为对照，WT和LS / +小鼠仅用载体处理。