内质网（ER）是真核生物细胞中的一种细胞器，它形成扁平的，膜封闭的囊或管状结构（称为水罐）的互连网络。ER的膜与外核膜是连续的。ER发生在大多数类型的真核细胞中，但红细胞中却不存在。此Cell Navigator™活细胞内质网（ER）染色试剂盒使用我们的ER Tracer™Green作为ER标记。ER Tracer™绿色染料是一种可透过细胞的荧光染料，对ER具有高度选择性。该染色剂由绿色荧光染料和ER粘合剂组成，它们在大多数细胞类型中选择性结合ER。对于某些细胞，ER Tracer™Green可能无法选择性结合ER。ER Tracer™Green具有与FITC基本相同的光谱特性，

平台

组件

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 将细胞与ER Green™Green工作溶液在37ºC下孵育15-30分钟
3. 在Ex / Em = 490/520 nm（FITC滤光片组）的荧光显微镜下分析细胞

重要说明
开始实验之前，请在室温下解冻所有试剂盒组件。

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. ER Green™储备溶液（500X）：
将20 µL DMSO（组分C）添加到ER Green™（组分A）小瓶中，并充分混合以制成500X ER Green™储备溶液。注意：20 µL 500X ER Green™储备溶液足以容纳一个96孔板。如果管子密封严密，未使用的500X ER Green™储备溶液可以在≤-20ºC下保存两周。避光。 

准备工作溶液

将20 µL 500X ER Green™储备溶液添加到10 mL活细胞染色缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成ER Green™工作溶液。该ER Green™工作溶液在室温下至少可稳定2小时。避光。

程序

1. 在细胞板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的ER Green™工作溶液。将细胞与工作液在37ºC下孵育15-30分钟，避光保存。注意： ER探针的*浓度取决于具体应用。浓度高于工作溶液可能对细胞有毒。可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。
    
2. 除去每个孔中的ER Green™工作溶液。用物理上相关的缓冲液洗涤细胞三遍。
    
3. 染色后固定细胞（可选）。用4％甲醛固定细胞5-10分钟。用物理上相关的缓冲液洗涤细胞三遍。
    
4. 使用带有FITC滤光片组（Ex / Em = 490/520 nm）的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

光谱

打开：高级频谱查看器

2003004005006007008009000102030405060708090100Wavelength (nm)Normalized Intensity (%)

光标位置

产品系列

图片

图1.使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜在96孔黑壁透明底板中培养的HeLa细胞中内质网（ER）染色的荧光图像。左：活细胞用ER选择性探针ER Green™（Cat＃22635，绿色），线粒体染料MitoLite™Red FX600（Cat＃22677，红色）和细胞核Hoechst 33342（Cat＃17530，蓝色）染色。右：用ER Green™（Cat22635，绿色）染色的活细胞用4％甲醛固定， 22636 Cell Navigator™活细胞内质网染色试剂盒*红色荧光* Cell Navigator™ Live Cell Endoplasmic Reticulum (ER) Staining Kit *Red Fluorescence* 100 Tests 22641 LysoBrite™溶酶体近红外荧光探针 LysoBrite™ NIR 500 Tests 22642 LysoBrite™溶酶体蓝色荧光探针 LysoBrite™ Blue 500 Tests 22643 LysoBrite™溶酶体绿色荧光探针 LysoBrite™ Green 500 Tests