实验步骤

标记六孔板

用marker笔在六孔板底部画平行线，平行线之间的距离0.5cm，为了保证后续拍照位置是相同的；

铺板

细胞重悬铺板，密度控制在第二天长满，若过夜后细胞wq长满，也可以适当延长培养时间，但如果细胞密度已经很大，尽量重新铺板，因为可能过一天后细胞太满，会导致细胞状态逐渐变差，后续细胞可能不迁移而是凋亡；

制造划痕

第二天用直尺比着使用10ul枪头制造划痕，划痕方向与标志线垂直，保持力度一致，尽量一次性划完，然后PBS冲洗3次，洗去漂浮的细胞

为了减少细胞增殖所引起的假阳性结果，降低细胞增殖对实验结果的影响，将wq培养基换成无血清培养基和低血清培养基（FBS＜2%继续培养细胞）；

拍照

拍照前用PBS冲洗3次，一般认为24h为细胞的一个周期，所以检测时间不要超过一个周期的时间，按照6孔板背后画线的垂直方向划痕