人体肝癌组织源组织提取物【Cancer: Human Liver Cancer Derivatives】
肝癌是发生于肝脏的癌病类疾病,仅次于胃癌、食道癌的第三大常见恶性肿瘤。肝癌（肝恶性瘤）的病理形态可分为巨块型、结节型、弥漫型和小癌型。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体肝癌组织中高质量的总RNA，PCR准备的一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人体肝癌组织源组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

培养步骤：

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

DIETHYL CHLOROPHOSPHITE精神分裂症与犰狳重复基因抗体anti- MARCKSL1 antibody乳酸脱酶(LDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ammonium hexachloroiridate(IV)醛脱酶1型抗体anti- MARCKSL1 antibody白介素1受体关联激酶2(IRAK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Cloxacillin sodiuM酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体anti- MARK1 antibody白介素1受体关联激酶2(IRAK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Follicle stimulating hormone酸化活化转录因子1抗体anti- MARK2 antibody小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

RHODAMINE B ISOTHIOCYANATE酸化活化复制因子2抗体anti- MARK3 antibody神经丝蛋白3(NEF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

OCIMENE活化转录因子5抗体anti- MARK4 antibodyApelin 36蛋白(AP36)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

SPIRO[2.4]HEPTA-4,6-DIENE活化转录因子6β抗体anti- MARS antibody载脂蛋白C3(APOC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

RONIDAZOLEAICAR酰基转移酶抗体anti- MARVELD2 antibody白介素7(IL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

人体肝癌组织源组织提取物Homo sapiens, human单核细胞趋化蛋白1抗体Human REDD1(Protein regulated in development and DNA damage response 1) ELISA Kit烟型胆受体β3(CHRNβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Phytophthora stricta Yang et al.双微体2癌基因抗体Human IFI35(Interferon-induced 35 kDa protein) ELISA Kit静止素Q6硫基酶1(QSOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Monographella nivalis var.nivalis (Schaf ..蛋白酶抑制剂B7抗体Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Rattus norvegicus (B cell); Mus musculus (my ..线粒体融合蛋白1抗体Human RGS2(Regulator of G-protein signaling 2) ELISA Kit腺苷A2a受体(ADORA2a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..O6基DNA基转移酶抗体Human APOA1BP(Apolipoprotein A-I-binding protein) ELISA Kit甘露糖酸异构酶(MPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Ceratocystiopsis proteae Wingfield et al., ..巨噬细胞移动抑制因子抗体Human RGS7(Regulator of G-protein signaling 7) ELISA Kit趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1αHuman APOL1(Apolipoprotein L1) ELISA Kit细胞外基质酸糖蛋白(MEPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Aspergillus leporis States et Christensen, ..巨噬细胞炎症因子1β 抗体 MIP-1βHuman DDT(D-Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)