大鼠心肌组织提取物
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2020-10-26 20:32:59
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上海西格生物科技有限公司

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产品简介

大鼠心肌组织提取物
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详细介绍

大鼠心肌组织提取物【Rat Heart: Normal Heart Derivatives】
心肌分布在心和邻近心的大血管根部。心肌主要由心肌纤维构成,期间有结缔组织、心血管和神经。心肌收缩有自主节律性,缓慢而持久。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠心肌组织中高质量的总RNA,PCR准备的条cDNA链,蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。

蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备大鼠心肌组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。

产品名称

 大鼠心肌组织提取物

 规格

 详见说明书

 货号

 XG-X7053

 

培养步骤:

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

DihydrostreptoMycin Sulfate感染性蛋白一蛋白1抗体anti- NEUROD4 antibody白介素1受体Ⅰ(IL1R1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

Dihydroxyacetone含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体anti- Neurofibromin Antibody白介素1受体Ⅰ(IL1R1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiMethyl M-phthalate;Methyl isophthalate植物生长激素ABP1抗体anti- Neurogranin antibody白介素1受体Ⅱ(IL1R2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiMethyl piMeliMidate dihydrochloride;DiMethylpiMelinediiMidate含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体anti- Neurokinin-1 receptor antibody白介素1受体Ⅱ(IL1R2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiMethyloctadecylchlorosilane;OctadecyldiMethylchlorosilane;DiMethyloctadecylsilyl chloride肌动蛋白相关蛋白1抗体anti- neuromedin B antibody白介素18(IL18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiosMetinα红细胞分化相关因子抗体anti- neuron navigator 1 antibody白介素17(IL17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiphenhydraMine Citrate血管紧张素激活蛋白1抗体anti- Neuropilin 1 antibody白介素16(IL16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

DiphenhydraMine Hydrochloride脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体anti- Neuroserpin antibody白介素15(IL15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

大鼠心肌组织提取物2×RNA Loading Buffer(Without Ethidium Bromide) 2×RNA上样缓冲液(不含溴化锭)酸化脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit血纤肽/纤维蛋白肽A试剂盒

Hematoxylin and Eosin Staining Kit 苏木素伊红(H&E)染色试剂盒朊/感染性蛋白抗体Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit血纤蛋白原γ链试剂盒

Colchicine 秋水仙(植物培养级别)P选择素糖蛋白配体1抗体Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit血纤蛋白试剂盒

Animal Tissue Direct PCR Kit 动物组织直接PCR试剂盒酸化桩蛋白Paxillin抗体Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit血吸虫抗原elisa试剂盒

L-Glutamine L-穿孔素抗体Human POU2F2(POU domain, class 2, transcription factor 2) ELISA Kit血吸虫抗体试剂盒

1× HBSS (with Ca2+, Mg2+, w/o phenol red), pH 7.4脂酰脱羧酶PISD抗体Human RASD1(Dexamethasone-induced Ras-related protein 1) ELISA Kit血吸虫抗体试剂盒

Penicillin-Streptomycin (100×), Suitable for Cell culture 细胞培养用-(双抗)p21蛋白抗体Human SCARB1(Scavenger receptor class B member 1) ELISA Kit血吸虫试剂盒

Penicillin-Streptomycin, Suitable for Cell culture 细胞培养用-(双抗)蛋白酸酶CD148抗体Human SRD5A1(3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1) ELISA Kit血栓素B2试剂盒

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