探求白细胞介素-37(interleukin-37,IL-37)在人外周血CD4~+效应T细胞(effector T cells)中的表达情况.2.研究在脂多糖(LPS)刺激下,CD4~+效应T细胞活化程度与IL-37表达水平的时效关系.3.证明IL-37可以抑制CD4~+效应T细胞发挥免疫效应.方法:部分:分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠分选分选CD4~+T淋巴细胞,通过胎盘蓝检测细胞活性,应用流式细胞技术检测CD4~+效应T细胞纯度.1.增殖活性检测:设置刺激剂组(脂多糖-LPS:1ug/ml),阴性对照组(即无LPS刺激细胞组),通过CCK-8技术检测不同分组之间CD4~+T淋巴细胞增殖活性差异,得出刺激时间(24h,48h,72h)与细胞增殖活性时效关系.2.IL-37基因水平表达情况:通过PCR技术明确CD4~+效应T细胞中IL-37mRNA的表达.3.IL-37蛋白水平表达情况:分别通过Western blot技术和流式细胞技术检测LPS刺激下,不同刺激时间下(24h,48h,72h)效应T淋巴细胞中IL-37蛋白表达水平差异.4.IL-37细胞内表达定位:通过免疫荧光与激光扫描共聚焦技术检测IL-37蛋白在效应T淋巴细胞中表达情况,明确其表达位置.第二部分:分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),应用免疫磁珠分选技术获得CD4~+效应T细胞,应用小分子干扰RNA沉默效应T细胞中IL-37的表达,另设置siRNA-scramble无效干扰细胞组,正常对照细胞组