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紫外分光度计 仪器自检结束后(7个自检项目均出现OK字样),按[MAIN MENU]键(主菜单),屏幕显示如下5个功能项: 1. Phtometry(定量运算);2.Wavelength Scan(波长扫描模式);3.Time Scan(时间曲线扫描);4.System(系统校正);5.Data display(光度直接测量模式)。按相应选项前的数字键,即可进入该选项的下一级子菜单。
紫外分光度计
基本使用方法:按“COTO”键,输入设定波长;四个比色皿,其中R位置放置参比试样,其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中,盖上样品池盖;将参比试样推入光路,按“ABS%”键,使仪器自动调零和置满度;然后将待测试样推入光路,显示试样的吸光度值;如果要想将待测试样的数据打印出,只需按“START/STOP”键即可。每天使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,若有溢出必须随时用滤纸吸干;使用完毕,用防尘套罩住。
因为荧光分析法的灵敏度高,其检出限通常比分光光度法低2~4个数量级,选择性也比分光光度法好,这是由于:a 荧光分析仪器在与激发光相垂直的方向测量荧光,与分光光度在一直线上测量相比,消除了透射光的影响,测量更为准确,灵敏度高;b 吸光光度法只采用一个单色器,而荧光分析仪器有两个单色器,分别用于获得单色性较好的激发光和分出某一波长的荧光,消除其它杂散光的干扰,其仪器的准确度、灵敏度也更高;c 荧光测量中的激发光源比吸收光度法的光源有更大的发射强度,光源更稳定,因此其仪器的准确度、灵敏度也就更高,综上所述,荧光分光光度计荧光法的检出限优于吸光光度法。
紫外可见吸收光谱法是根据溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结构的方法,而荧光分析法是由于处于一激发单重态低能级的分子以辐射跃迁的形成返回基态各振动能级时产生的荧光的分析方法,两者的区别在于前者研究的是吸收光谱,且电子跃迁为激发态的振动能级到基态的振动能级间的跃迁。