ROS活性氧检测

简介:

  活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。DHE活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DHE(Dihydroethidium)进行活性氧检测的,DHE可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的ROS氧化，形成氧化乙啶；氧化乙啶可掺入染色体DNA中，产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生，可以判断细胞ROS含量的多少和变化。二氢乙啶在细胞内主要被超氧阴离子型ROS氧化，用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种快速简便的组织或培养活细胞中ROS经典检测方法。

  在激发波长535nm，发射波长610 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光，从而测定细胞内活性氧水平。

ROS活性氧检测

DHE探针标记：  

1、 DHE溶液可在新鲜培养液、缓冲盐溶液或组织灌流液中稀释到所需浓度，100-1000倍稀释，以此染色液更换细胞培养液或灌流液；也可直接向细胞孵育液体或灌流液中加入DHE探针溶液至所需浓度。

2、 依据细胞ROS含量的不同，DHE终浓度可选择在100-1000倍稀释的范围，孵育

时间可选择10-90 分钟，在37℃或室温进行避光孵育。

3、 孵育结束后,用新鲜溶液清洗细胞或组织.