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黑色素染色
一、 实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗,蒸馏水浸洗3-5遍。
2、工作液配制:取硝酸10ml,逐滴加入浓氨水至产生沉淀后,继续滴加氨水,边滴边摇动,使产生的沉淀又复溶解,溶液变清。再滴入硝银数滴使溶液呈轻微混浊,zuihou加入蒸馏水20ml,过滤后即可使用。
3、工作液孵育:切片浸入银氨液并加盖,置于4℃避光反应12-18h,蒸馏水洗3遍。
4、硫代酸钠处理:硫代硫钠快速处理几秒,流水冲洗5min。
5、复染VG:将饱和kuweisuan与酸性品红9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,无水乙醇三缸快速脱水。
透明封片:干净的二甲苯透明1-5min,中性树胶封片。
7、显微镜镜检,图像采集分析。
二、结果判读:
黑色素、亲银细胞胞质呈黑色,胶原纤维呈红色,肌纤维和红细胞呈黄色。
三、注意事项:
1、配工作液和孵育时用的容器,在用之前必须用蒸馏水清洗干净,否则易出现杂质和沉淀。
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