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碱性品红染色
一、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、氧化:酸化:硫酸=1:1混合)氧化5min,自来水洗。
3、漂白:草酸溶液漂白1-2min,至无色,流水冲洗2min,95%的乙醇稍浸洗。
4、碱性品红染色:切片入品红染液中浸染并加盖,室温下3~4h,流水冲洗。
5、背景分化:盐酸酒精分化至无染液脱下,弹力纤维清晰的紫红色,背景淡紫或近乎无色。
6、复染VG:将饱和kuweisuan与酸性品红9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,无水乙醇三缸快速脱水。
7、透明封片:干净的二甲苯透明1-5min,中性树胶封片。
8、显微镜镜检,图像采集分析。
二、染色判读:
弹力纤维紫红色,胶原纤维红色,背景其他成分黄色。
三、注意事项:
1、VG复染过程中水洗要快,防止红色褪掉,无水乙醇也要快洗,防止黄色变暗。