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普鲁士蓝染色价格:25元
普鲁士蓝染色染色步骤:
1、石蜡切片脱蜡至水;
2、蒸馏水洗两次;
3、取等量2%亚铁氢化钾和2%盐酸混合,染色30~45min;
4、蒸馏水洗,0.1%核固红复染3min(染液用一段时间后调整为5min);
5、无水乙醇脱水(两缸各5分钟);
6、正丁醇30s;7、二甲苯透明(两缸各5min), 中性树胶封片(封片过程中保证组织上的二甲苯不能干,否则在高倍显微镜下观察易出现小水珠结晶)。
染色结果:含铁血黄素呈蓝色,胞核呈红色。
注意事项:
1、组织应采用缓冲中性甲醛液固定,若用一般的甲醛液,则应作短时间固定后即包埋切片,经甲醛液长期固定的组织反应不良。
2、盐酸以分析纯较好,因粗制盐酸内含有较多的铁,可导致假阳性。
3、在操作过程中容器要干净,避免使用铁制工具(可用不绣钢制工具)。
4、铁反应前的各步骤以蒸馏水冲洗,以防自来水内的铁离子与组织内的钙盐结合产生假阳性反应。
5、制作对照片时,取另一张相同连续切片脱蜡至水,置入5%的草酸中作用2~6小时,即可将含铁血黄素溶去,再染普鲁士蓝,铁反应阴性。