免疫荧光/IF - FJB染色价格:55元

免疫荧光/IF - FJB染色染色机制

　　FJB染色的原理是FJB染液是一种带荧光的物质，可以与变性的神经元结合从而发绿色荧光，而正常神经元不会与FJB染液结合所以不发荧光。

　　应用

　　FJB可以与变性神经元结合发出绿色荧光，从而可以标记神经组织内的变性坏死神经元。可以借此研究不同处理方法对神经组织的损伤。

　　染液配制

　　纯水配成5mg/ml的浓缩液，用时0.1%的冰醋酸做溶剂，1:50-1:100稀释

　　染色方法

　　1、石蜡切片脱蜡至水。

　　2、用现配的0.1%冰醋酸做溶剂，按1:50-1:100配制FJB的工作液，混匀，滴加到组织上室温孵育20min;

　　3、纯水冲洗，DAPI染核，再用PBS冲洗;

　　4、吹风机吹干，二甲苯透明2min，加一滴中性树脂封片，晾干。

　　染色结果

　　坏死神经元胞浆和胞核呈绿色荧光，正常神经元无着色。神经元着色有时候伴随着脑梗，在梗死附近着色较明显。

　　注意事项

　　1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要现配现用。

　　2、所有染色步骤完成后，切片要自然晾干或用吹风机低档吹干，然后透明，树胶封片，因为已结合的FJB可溶于甘油，酒精，所以不能直接用荧光封片剂封片，也不能在酒精中做脱水处理。

　　3、FJB与组织的结合可逆，因此做完后要尽快镜检拍照，避免荧光淬灭。