ZCIBIO茁彩生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海所在地
RIPA裂解液(强)WB配套产品
1.裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀。
2.主要由NP-40、脱氧胆酸钠、磷酸钠、SDS、EDTA、蛋白酶抑制剂等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
3.—20℃,12个月
使用方法:
对于组织样品:
1.组织块用冷PBS洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。
2.加入10倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)使用高速组织研磨仪*匀浆。
3.将匀浆液转移至1.5mL离心管中,振荡。冰浴30 min,期间用移液器反复吹打,确保细胞*裂解。
4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白溶液。
对于培养细胞样品:
1.对于贴壁细胞:
(1)用PBS冲洗细胞2-3次。后一次*吸干残留液。
(2)加入适当体积的本试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-5 min。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。
(3)用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到1.5mL离心管中。
2.对于悬浮细胞:离心收集细胞,每6孔板细胞加约250 μL本试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。
3.冰浴30 min,期间每10 min用200 μL移液器反复吹打数次,确保细胞*裂解。
4.12000g离心5 min,收集上清,即为总蛋白。
RIPA裂解液(强)WB配套产品