| 一、细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | 人胶质瘤细胞 |
| 细胞别称 | U251; U-251MG; U-251-MG; U-251_MG; U251-MG; U251MG; U-251; U251; U251n; U251N; 251 MG; 251MG |
| 细胞货号 | SNL-095 |
| 细胞种属 | 人 |
| 生长情况 | 贴壁 |
| 培养条件 | H-DMEM+10%FBS+1%双抗 |
| 培养环境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、细胞培养操作 | |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右*，轻轻晃动培养瓶以使*铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未*脱落时加2-3ml*培养基终止*消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的*培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足*培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌*消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
| 三、细胞冻存操作 | |
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手*)或92%*培养基+8%DMSO(高手*); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：
1.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条；
我们*使用尚恩生物U251（人胶质瘤细胞）钻用*培养基（产品货号：SNLM-095）作为体外培养U251（人胶质瘤细胞）的培养基。