猪瘟间接血凝抗体检测ELISA试剂盒

使用说明书

【产品名称】

通用名：猪瘟间接血凝抗体检测ELISA试剂盒

英文名：The Indirect HaemaggLutination Assay Kit for Detecting Antibodies of Swine Fever

汉语拼音Zhuwen Jianjiexuening KangtiJiance Shijihe

【包装规格】100头份/盒

【主要组成】

【试验仪器】

1．96孔110°V型科研血凝板。

2．8道或12道微量移液器。

3. 微量振荡器。

【物理性状】

1．抗原  摇匀呈棕红色（或咖啡色），静置后，血球逐渐沉入瓶底；

2．阴性对照血清  淡黄色清亮稍带粘性的液体；

3. 阳性对照血清  微红或淡黄色稍浑浊带粘性的液体；

4. 稀释液  淡黄色或无色透明液体，低温下放置，瓶底易析出少量结晶，在水浴中加温后即可全溶，不影响使用；

【作用与用途】

用于检测猪瘟疫苗免疫血清抗体效价。

【用法与判定】

1 用法

1.1加稀释液

  在血凝板上1～7排的1～10孔，第8排的1～3孔和第5～7孔，加稀释液50μl/孔。

1.2稀释待检血清

  待检血清使用前，需经过56℃水浴灭活30分钟。取待检灭活血清样品50μl。分别加入反应板1～6排的第1孔中，与稀释液混匀后吸取50μl。加于第2孔中，依次作2倍系列稀释至第10孔，第10孔混匀后取出50μl弃去。

1.3稀释阳性对照血清

  在血凝板的第7排第1孔加阳性血清50μl，2倍系列稀释至第10孔，混匀后从该孔取出50μl丢弃。此时被检血清和阳性血清的稀释倍数依次为1:2～1:1024。

1.4稀释阴性对照血清

  在血凝板上第8排的第1孔加阴性血清50μl，对倍稀释至第3孔，混匀后从该孔取出50μl丢弃。此时阴性血清的稀释倍数依次为1:2、1:4、1:8。第5～7孔为稀释液对照，每孔仅加入50μl稀释液。

1. 5加血凝抗原

  血清稀释孔和稀释对照孔加血凝抗原（充分摇匀，瓶底应无血球沉淀）50μl/孔。将反应板置微量振荡器上震荡2～3分钟或用手依次四边轻拍，直至血球分布均匀。封板膜封板，室温（20～25℃）下静置2～3小时判定结果，也可以延长至次日判定。

2 结果判定

  以呈现“++”血凝反应的血清稀释度作为该血清的间接血凝抗体效价。血凝反应强度表示如下：

“++++”红细胞全部凝集，形成一层均匀膜，布满整个孔底。

“+++”红细胞在孔底形成一层薄膜，面积比前者略小。

“++”红细胞在孔底形成一层薄膜，边缘松散或呈锯齿状。

“+”红细胞在孔底呈稀薄、散在、少量凝集，孔底有小圆点。

“±”红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心有空斑。

“-”红细胞沉于孔底，呈光滑的圆点。

当阳性血清抗体效价≥1:256,、阴性血清效价≤1:8、稀释液对照孔无自凝现象时，试验成立。接种猪瘟疫苗的猪群免疫抗体效价≥1:16为免疫合格。

【注意事项】

1. 为使你的实验获得正确结果，请你在使用前仔细阅读本说明书；

2. 收到本试剂盒时，应立即打开包装，取出血凝抗原瓶，用力摇动，使粘附在瓶盖上的红细胞摇下，否则容易出现沉渣，影响效果；

3. 勿使用90°和130°血凝板，建议请不要使用不合格的一次性血凝板，以免误判结果；

4. 严重溶血或严重污染的血清样品不易检测，以免发生非特异性反应；

5. 每次检测只做一份阴性、阳性和稀释液对照；

6.用过的血凝板应及时在水龙头下冲净血球。再用蒸馏水或去离子水冲洗2次。甩干水分放置37℃恒温箱内干燥备用。血凝版应该定期浸泡在洗液中也可浸泡在5%盐酸液内，48小时捞出后清水冲净。

【规格】 2ml/瓶

【包装】 5瓶/盒

【贮藏与有效期】

1. 血凝抗原：2～8℃保存，切勿冷冻。保存期6个月；

2. 阴、阳性对照血清：2～8℃保存，切勿冷冻。保存期6个月；

3. 稀释液：2～8℃保存，切勿冷冻。保存期6个月；

   4.有效期为6个月。生产日期、有效期见外包装。