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mFluor Violet 540小麦胚芽凝集素探针
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mFluor Violet 500小麦胚芽凝集素探针
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mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素（WGA）
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AF555小麦胚芽凝集素（WGA）探针
面议Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因检测的试剂盒，β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因，而这其中，萤火虫荧光素酶是功能最多的报告基因。近期，其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升，例如来源于海洋桡脚类的动物高斯基质衍而来的生物发光酶，即高斯荧光素酶。由于高斯荧光素酶受体分子非常小，因此不需要ATP的辅助。高斯荧光素酶是一种分子量为20kDa的蛋白质，在氧分子存在条件下，催化腔肠素氧化形成荧光。基因检测试剂盒使用*的荧光基质对细胞培养基中荧光素酶活性进行定量检测。我们所提供的荧光产品与高斯荧光素酶反应时，会产生强烈荧光。本试剂盒提供所有必需组分，并且适用于HTS（高通量筛选）研究。本试剂盒灵敏度高，可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供的Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒。
适用仪器
| 发光酶标仪 | |
| 推荐孔板: | 纯白色孔板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备样品 (50 µL)
2.添加 50 µL 高斯荧光素酶工作溶液
3.室温孵育 10 - 15 分钟
4.检测发光强度
溶液制备
1.储备溶液的配制
高斯荧光素酶原液 (100X)
将 50 µL（适用于 Cat#12530）、0.5 mL（适用于 Cat#12531）或 2.5 mL（适用于 Cat#12532）反应缓冲液（组分 B）转移至 1 瓶荧光素酶底物（组分 A）中，并充分混合。注意：添加前，先短暂离心，然后打开荧光素酶底物（组分 A）小瓶。
1.工作溶液配制
使用检测缓冲液（组分 C）按 1:100 稀释倍数稀释 100X 高斯荧光素酶检测储备液，制备 高斯荧光素酶工作液。
注意：重构的 高斯荧光素酶工作溶液对光非常敏感。它不稳定，应新鲜配制，置于冰上，并在 2 小时内使用。
点击查看细胞制备指南
样品操作及分析
1. 通过在所需化合物缓冲液中添加 10 µL 10X 测试化合物（96 孔板）或 5 µL 5X 测试化合物（384 孔板），用测试化合物处理细胞（或样品）。对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。
2. 将细胞板在 37°C、5% CO2 培养箱中孵育所需的时间，通常为 4 小时至过夜。
3. 运行 Gaussia 荧光素酶测定：将 50 µL/孔/96 孔板或 12.5 µL/孔/384 孔板连续稀释的 Gaussia 荧光素酶或培养上清液移至微量滴定板中，然后与 50 µL/孔/96-孔板混合。 Gaussia 荧光素酶工作溶液的孔板或 12.5 µL/孔/384 孔板。
4. 将孔板在室温下避光孵育 10 至 15 分钟。
5. 用光度计读取发光强度。
