AAT Bioquest 品牌
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西安市所在地
链霉亲和素-Xtra IF647缀合物广泛用于和生物su缀合物结合以检测多种生物靶标，例如蛋白质，核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择，例如免疫荧光显微镜，流式细胞术，蛋白质印迹和其他生物应用，因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物su，在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物（例如：FITC，TRITC，TexasRed®，Cy3®，Cy5®和Cy7®），以及我们优异的水溶性，光稳定性iFluor 和mFluor 染料。然而，常规的生物su-亲和素检测系统仍然受到现有荧光缀合物有限信号强度的限制。链霉亲和素Xtra iFluor缀合物是超亮链霉亲和素缀合物的新家族，其激发和发射性能与Alexa Fluor荧光团几乎相同，信号增强了3到5倍。它是在细胞成像或流式细胞仪中检测低丰度靶标的一组强大工具。iFluor 647是Cy5通道成像中常见的深红色荧光色之一。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素-Xtra IF647缀合物。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 633nm |
| Em： | 660/20nm |
| 通道： | APC通道 |
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | Cy5 滤波片组 |
| Em： | Cy5 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品实验方案
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液（1 mg / mL）：加入100 uL的Cat＃46006和1 mL的Cat＃46007的ddH2O，制成1mg/mL的储备溶液。注意：此重组溶液在4°C储存并避光保存后，可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间，可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样，或者不分装添加等体积的甘油（浓度为50％），然后将溶液存储在-20°C（避光）。
2.工作溶液配制
链霉亲和素-Xtra 工作溶液：对于IF，建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS，建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。注意： PBS + 0.1％BSA可用作染色缓冲液。 注意：为了获得每种应用的性能，需要仔细确定该试剂的浓度。注意： 建议的工作稀释度仅供参考，建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。
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样品示例及操作
按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物su偶联的二抗工作溶液。注意：请验证您的生物su偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如，如果一抗是小鼠抗体，则与生物su结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意： 孵育的时间需要仔细确定。
取出工作溶液，然后将细胞重悬在缓冲液中。
使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。
图1.用链霉亲和素-Xtra iFluor 缀合物和链霉亲和素Alexa Fluor 缀合物染色的Hela细胞图像。Hela细胞用4％多聚甲醛固定30分钟，用0.02％Triton X-100透化10分钟，并用1％BSA封闭1小时。然后将固定的Hela细胞在室温下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠单克隆抗体染色1小时，然后用GxM IgG-生物su（货号16729）染色，然后用Streptavidin-Xtra iFluor 647和Streptavidin-Alexa Fluor 647染色。细胞核用Hoechst 33342（蓝色，货号17535）染色。
