样品实验方案

1.蛋白质沉淀：

1.1均质和离心后，制备蛋白浓度小于50 mg / mL的澄清溶液样品。 将蛋白质样品放在冰上。 注意：高蛋白浓度的样品可能需要稀释。

1.2向100 µL蛋白质样品中加入10 µL冷的TCA（组分A）并短暂涡旋混合均匀。

1.3将样品在冰上放置10分钟。 以12,000 rpm离心5分钟。 将上清液（去蛋白样品）转移到另一个试管中。 注意：建议中和TCA中的样品，并立即用于相关测定。 但是，TCA中的脱蛋白样品可以在-70°C下保存长达一个月。

2.TCA中和：

2.1要中和过量的三氯yi酸，可在收集的上清液中加入10 µL冷中和溶液（组分B），并短暂涡旋混合均匀。

2.2将样品在冰上放置5分钟。 现在将样品脱蛋白并中和。

2.3（可选）读取280 nm（OD）处的吸光度以检查样品是否脱蛋白。

样品示例

      添加TCA和中和溶液（总体积约120 µL）可稀释原始样品（初始样品体积为100 µL）中的蛋白质浓度。 稀释系数可以通过以下公式计算：

      原始蛋白质浓度％=（初始样品体积）/（初始样品体积+ TCA体积+中和溶液体积）