适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中培养细胞4-6小时
2.将细胞转移到无血清培养基中1小时，并根据需要处理细胞
3.加入100μL/孔的脂肪酸染料加载溶液
4.监测荧光增加在Ex / Em = 485/515 nm处立即进行动力学或在孵育60分钟后进行终点读数（底部读取模式）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
TF2-C12脂肪酸原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到TF2-C12脂肪酸（组分A）的小瓶中并充分混合。 注意：20μL荧光脂肪酸底物原液足以用于一个平板。 如果将管密封并避光，可以将未使用的荧光脂肪酸底物储备溶液等分并在<-20℃下储存长达两个月。 避免反复冻融循环

2.工作溶液配制

脂肪酸染料加载溶液：
将20μLTF2-C12脂肪酸储备溶液加入10mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合。 注意：10毫升脂肪酸染料加载溶液足以用于一个平板; 为每个平板做准备并进行实验。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。

2.从培养箱中取出化合物处理的细胞板，加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）（包括空白孔）的脂肪酸染料加载溶液。

3.使用底部读取模式，使用荧光酶标仪在Ex / Em = 485 / 515nm（在495nm处截止）测量荧光信号。 注意：对于动力学读数：立即以20秒间隔读取荧光强度30-60分钟。 注意：对于终点读数：读取30-60分钟孵育结束时的荧光强度。

数据分析