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mFluor Violet 540小麦胚芽凝集素探针
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面议吲朵菁绿ICG-Osu是一种用于医学诊断的花青染料。它用于确定心输出量,肝功能和肝血流量,以及用于眼科血管造影。它具有接近800nm的峰值光谱吸收。这些红外线能穿透视网膜层,使ICG血管造影成像比荧光血管造影更深的循环模式。ICG的半衰期为150至180秒,仅通过肝脏从胆汁液中排出。最近的一项研究表明ICG在注射后20分钟内靶向动脉粥样硬化,并提供足够的信号增强,用于动脉粥样硬化兔子体内的脂质,发炎,冠状动脉大小的斑块的检测。离体荧光反射成像显示,与注射生理盐水的动脉粥样硬化兔相比,注射ICG的动脉粥样硬化兔的斑块靶 - 背景比高。氨基反应性ICG衍生物用于与抗体和其他生物分子制备ICG生物缀合物。所有ICG染料都需要溶解在DMSO中。百萤生物为您提供优质的吲朵菁绿ICG-Osu。
将无水DMSO加入到ICG染料小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液B),现配现用,保持溶液新鲜。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 - 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中,蛋白质溶液(95μl溶液A)。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行结合反应(见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比例(DOS)。
3.6运行上述4种缀合物的功能检测,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。