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面议Cyber Gold核酸凝胶电泳染料 染色液远优于溴化乙锭或其它任何凝胶系统中使用的任何凝胶染料,包括琼脂凝胶和聚丙烯酰胺凝胶、天然凝胶、甲醛 凝胶、乙二醛凝胶和尿素凝胶等。它是灵敏的dsDNA、ssDNA和RNA染料,可以使用标准的300 nm紫外透射仪观察结果,因此,您不使用昂贵的激光扫描仪也能获得很高的灵敏度。Cyber Gold核酸凝胶染料一旦结合核酸,荧光会增强1000倍以上,量子产率约为0.6。而EB仅为30倍,量子产量大约在0.15。因此,利用300 nm紫外透射仪和黑白成像,Cyber Gold检测凝胶中DNA和RNA的灵敏度比EB高5 到10倍以上。色如其名,可以观察到金色的条带。Cyber Gold染料可用于检测包括双链DNA,单链DNA和RNA,适用于琼脂糖凝胶电泳、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、单链构象多态性(SSCP)研究,以 及其他常规的分析。百萤生物为您提供优质的Cyber Gold核酸凝胶电泳染料 染色液
实验方案
1.电泳后染色
1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。
1.2把保存于DMSO中的10000X Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料用TE或TBE 缓冲液 (PH 7.5-8)按1:10000稀释成1X Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Gold 用 TE or TBE 缓冲液稀释到100mL).
1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Gold 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液足以满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,确保整块凝胶浸入液面下.
注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。
1.4浸泡的凝胶室温下放置10到40分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。
1.5拍照时使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射透视仪或蓝光透射仪观察。通常爆光时间較其他的染料短。
2.Cyber Gold 脱色法
Cyber Gold 脱色可以通過簡單的乙醇核酸沉淀法把Cyber Gold染料从DNA或RNA中分离出来。超过97%的Cyber Gold染料只需一次乙醇核酸沉淀即可被清除。如果在加上醋酸銨到乙醇核酸沉淀步骤里,那么超过99%的染料可被清除。
2.1在Cyber Gold核酸样品加入以下三种盐之一,样品的最终浓度为:200mM NaCl,300 mM乙酸鈉(pH值5.2)或2 M的乙酸銨。混合均匀。
2.2加入两个容量的冰镇无水乙醇,混合均勻。放置在0℃(冰浴)30分钟。
2.3離心至少15分鐘,转速为10,000-12,000g。
2.4除去上清液,用70%乙醇清洗核酸沉淀。
2.5再次离心沉淀核酸,让核酸沉淀在空气中自然干燥,並根据需要重新溶于所需溶济中。