StabilizorT1生物样品稳定仪的详细介绍
在蛋白质组研究中,要得到准确可靠的结果,很大程度上取决于样品的前处理方法。保持样品的稳定性,即样品是否反映目标蛋白质在活体内的原始状态则尤为重要。一旦样品从机体分离,调控平衡被打破,对于某些蛋白质或多肽,离体降解是一个很快速的过程。降解导致蛋白质的种类、含量和修饰快速变化,使得检测到的部分蛋白质或肽段实际上是高丰度蛋白质的降解产生的片段,而不是样品的原始蛋白质(如下图)。
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在细胞和组织表达的蛋白质组中,发挥重要生理功能、研究意义和价值的蛋白质通常是一些含量很小、稳定性差的低丰度蛋白质或多肽。随着蛋白质检测技术的发展,检测方法的灵敏度越来越高,也对样品前处理方法提出了更高的要求,如何在处理样品过程中保留这些蛋白质或多肽就变得越来越重要。
因此采用一种快速、有效的样品稳定方法,尽量缩短样品采集与稳定之间的间隔时间并将样品前处理过程标准化,对于蛋白质研究具有重要意义。高质量的样品前处理有利于获得高质量的数据,进而增强分析结果的可靠性和可比性。
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Stabilizor系统是瑞典Denator公司的生物样品稳定技术。该系统包含Stabilizor T1主机和Maintainor样品卡,用于解决蛋白质离体降解的难题。Stabilizor系统能快速、均匀、准确的将热量传递给样品,破坏蛋白质中的氢键,保留氨基酸链的共价肽键,即破坏蛋白质的二级及以上结构,保留一级结构的完整性。这种不可逆的失活效应将样品中的各种酶类失活,从而将蛋白质离
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使用Stabilizor系统无需添加辅助抑制试剂即可性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性,防止蛋白质降解发生。降低蛋白质组的复杂性,减少高丰度蛋白质降解片段的干扰,增加分析和发现具有重要价值的蛋白质/多肽生物标记物的可能性。Stabilizor处理样品具有的稳定性、标准化和可追溯性,更易得到高质量的分析数据。
液氮速冻结合酶抑制剂是目前广泛使用的阻止样品降解的标准方法。但这种方法会破坏细胞膜和细胞结构,使得样品融化后,降解和修饰蛋白质的酶分布得更广泛,导致更多蛋白质或其修饰形式发生改变。而且这种方法具有可逆性和选择性,无法全面的阻止样品中酶类的活性,添加的试剂还会干扰后期样品分析,部分试剂具有一定毒性。
使用Stabilizor系统的优势:
● 是一种纯物理的样品稳定方法,不需使用干扰后期分析的酶抑制剂
● 处理时间短,一般在一分钟以内即可将样品中的各种酶类失活
● 有利于保留样品在活体内蛋白质的磷酸化和其它翻译后修饰的真实状态,保留不稳定、易降解的低丰度蛋白质
● 避免了样品中低丰度蛋白质或多肽受高丰度蛋白质降解片段的干扰,有助于发现新的蛋白质、多肽以及它们的修饰形式
● 性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性,样品经稳定后,即可在常温下进行制备操作,无需担心酶对蛋白质、多肽的降解或改变它们的修饰形式
● 降低蛋白质组的复杂程度,缩小动态范围,增加分析和发现具有重要价值的蛋白质或多肽生物标记物的可能性
● 使用方便,在采样的同时即可稳定样品,缩短样品离体降解的时间
● 样品采集和储存的过程高度标准化,使分析结果更加可靠,数据更具可比性,便于进行比较蛋白质组研究
● 使用MALDI-MSI检测目标蛋白质或多肽,Stabilizor是目前有效的样品稳定方法
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技术参数:
Stabilizor T1主机
● 4.3英寸彩色触摸显示屏
● 对样品卡施加真空压力范围:10—100mbar
● 噪音:低于45分贝
● 样品尺寸测量激光分级:CLASS 1蓝色激光
● 内置处理器:1 GHz×86,内存为1GB
● 操作系统:Linux开源软件
● 三个USB接口
● 外部尺寸(L×W×H):465×306×143mm
● 净重: 6.7kg
● 功率:为350瓦,正常使用为70瓦,待机为20瓦
● 电源:100-240V/50-60Hz
● 使用环境温度:10—40℃
● 使用环境相对湿度:80%(无凝结)
Maintainor样品卡
● 外部尺寸(L×W×H):85×54×2mm
● 样品腔尺寸:高7mm,直径33mm
● 使用环境相对湿度:85%(无凝结)
● 材质:PC,带特氟龙涂层
● 适用温度:-80—100 ℃
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Stabilizor系统有助于揭示真正的蛋白质组、多肽组和磷酸化图谱
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