支原体污染：组织培养应用中的关键问题

何谓支原体?

作为一种非常之小的细菌，支原体的特点是没有精密的细胞壁。此细胞壁缺失，导致有机体具有可塑性，使得支原体形状具有高度的多变性，从球状到分支长丝状均有呈现，且大小直径从0.15到0.3µm之间不等。由于其可塑性，支原体可以通过0.2µm级（细菌截留）过滤器，此外，由于其细胞壁缺失，支原体能够耐受某些阻碍细菌细胞壁合成的抗生素（譬如*）。

支原体为何应当受到我们的重视?

支原体是细胞培养中的常见污染物。由于其尺寸非常之小，且生长速度较慢，利用常规实验室方法难以辨认污染物。然而，对于任何受其感染的细胞培养，支原体都具有隐伏性的影响。譬如，包含一百万个哺乳动物细胞的培养基，可被多达5亿个支原体感染（Stanbridge，1981）。存在如此巨大数量的污染物，将会强烈地影响被感染宿主细胞的结构和功能，譬如：

•            改变细胞生长速率
•            抑制或刺激细胞转化
•            潜在有害的形态变异
•            改变DNA、RNA以及蛋白质合成
•            改变酶作用
•            染色体异常
•            减少或增加病毒产量
•            耗尽生长培养基中的营养成分
•            改变细胞表面抗原特性
•            降低肿瘤细胞的恶性

参考文献: Stanbridge, Eric J. “支原体检测－获得科学准确性的必要手段' Israel J Med Sci 17: 563-568 （1981）.

鉴于支原体污染对于培养细胞的不利影响，显而易见，对于任何源自受到支原体感染的细胞培养相关数据，其准确性均有待置疑，并应怀着谨慎和怀疑的态度处理这些数据（Stanbridge，1981）。

选用何种孔径的滤膜，方能有效去除支原体?

利用0.1µm级过滤器，能够截留支原体。Pall Life Sciences出品的0.1µm级Supor^®滤膜，配备亲水性本质的聚醚砜滤膜，以去除支原体。Pall公司多种实验室过滤器产品中均整合了此滤膜，以作为组织和细胞培养应用的理想之选。

利用Pall公司0.1µm级滤膜，可以zui大程度地保障支原体不会藉由血清（或含有血清的介质）导入培养基。