步骤1. 目标基因全基因合成：

1. 从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因，我们免费提供给客户。

2. 根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。

3. 合成设计好的基因序列。

提供给客户：目标基因（在T载体或常规穿梭载体上）及测序报告。
价格：3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒，则免去这部分费用．
时间：2~3周，根据基因的大小而定.详见全基因合成服务
步骤2. 目标基因亚克隆：

1. 扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。

2. 将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。

3. 测序验证构建质粒的准确性。

4. 闪晶生物免费提供如下表达载体：

提供给客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
价格：免费　
时间：1-2周
步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：

1. 扩增并抽提构建好的表达质粒。

2. 将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。

3. 至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。

4. SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。

5. 可提供表达菌株：DH5α,  , JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。

提供给客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
价格：免费
时间：1周
步骤4. 目标蛋白表达及纯化：

1. 摇瓶培养1L重组细菌，诱导表达目标蛋白。

2. 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

3. 利用蛋白酶去除不需要的纯化标签，再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。

4. 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5. 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

提供给客户：纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告。