CellSorter单细胞分选系统

背景：

　通常情况下，分子生物学研究都是针对组织样本或者一个细胞群来进行。然而，组织样本中一般包含多种类型的细胞，即使来自于同一个细胞群的各个细胞间的基因水平、表达水平会存在不同程度的差异，互为异质细胞。以组织或细胞群为起始样本的研究，可能会因为细胞异质性而获得错误的结果。以肿瘤发生为例，肿瘤的发生是单细胞中多种突变积累演化的结果，一个肿瘤组织中往往会包含处于不同阶段的肿瘤细胞甚至前肿瘤细胞。采取组织样本进行研究，稀有却重要的基因突变很可能淹没在背景数据中，而采用单细胞进行实验则可避免上述的情况出现，获得更可靠更有意义的结果。

单细胞实验在肿瘤、干细胞、神经、生殖、微生物学等多个领域以及法医学中应用广泛，主要是基于以下特点：

　　单细胞亦包含一个物种全部的遗传信息；

　　单细胞实验避免了细胞异质性的干扰，准确性更高。

单细胞实验有利于还原生物事件本身，诸多生物事件如胚胎发育、肿瘤形成及转移等均以单细胞为起点。

概述

匈牙利Cellsorter公司推出的单细胞获取平台为获取单细胞提供了完整的解决方案—全自动 Cellsorter单细胞分选系统。

Cellsorter可从血液、骨髓、制备的组织细胞悬浮等液态体系中挑选出感兴趣的单细胞

CellSorter单细胞分选系统以显微镜为基础，采用毛细管技术从少量样本中分离单细胞和稀有细胞的自动细胞分选系统，操作步骤是由软件控制。

整个过程分为三个步骤：

1．细胞识别

2．细胞获取

3．细胞沉积

该系统是一种安装在正常倒置显微镜上的计算机控制的微量吸管系统，精准量化细胞形变、细胞间粘附作用和细胞与基质之间的粘附作用，可同步实现荧光观测、单细胞捕获、分选和分离和图像视频处理

一个可在已有显微镜上搭建的，可同步实验吸吮加载、图像视频处理与荧光观测的细胞力学装置。可建立微管吸吮力学加载-荧光观测耦合的分子-细胞动力学实时原位观测系统。
单个细胞粘附力测定模式图：
细胞与细胞之间粘附力测定模式图：
通过施加负压将细胞的一部分（或整体）吸入微管中,测量一定负压吸吮作用下细胞的变形及其时间历程或细胞粘附分离的临界负压来评价细胞的变形特性，同时记录细胞的吸入量。
*图像处理技术和力学模型，精准量化测量细胞形变、细胞对之间的相互作用以及黏附特性、基质附着细胞测定细胞硬度等力学特性。
压电微管吸吮模块：对样品池内细胞的捕获、分选、吸吮和微操控；
集成倒置荧光相差显微镜：用于对所述细胞进行荧光激发；
信号采集模块：用于对微弱荧光信号的采集；
控制模块：用于对微管吸吮和荧光采集同步触发，并进行数据分析处理 

应用范围：

1）计算机控制的自动化微吸管系统测定单细胞黏附力

2）计算机控制的自动化微吸管系统测定细胞与细胞之间的黏附力