CellSorter计算机控制的自动化微吸管系统

背景：

　通常情况下，分子生物学研究都是针对组织样本或者一个细胞群来进行。然而，组织样本中一般包含多种类型的细胞，即使来自于同一个细胞群的各个细胞间的基因水平、表达水平会存在不同程度的差异，互为异质细胞。以组织或细胞群为起始样本的研究，可能会因为细胞异质性而获得错误的结果。以肿瘤发生为例，肿瘤的发生是单细胞中多种突变积累演化的结果，一个肿瘤组织中往往会包含处于不同阶段的肿瘤细胞甚至前肿瘤细胞。采取组织样本进行研究，稀有却重要的基因突变很可能淹没在背景数据中，而采用单细胞进行实验则可避免上述的情况出现，获得更可靠更有意义的结果。

单细胞实验在肿瘤、干细胞、神经、生殖、微生物学等多个领域以及法医学中应用广泛，主要是基于以下特点：

　　单细胞亦包含一个物种全部的遗传信息；

　　单细胞实验避免了细胞异质性的干扰，准确性更高。

单细胞实验有利于还原生物事件本身，诸多生物事件如胚胎发育、肿瘤形成及转移等均以单细胞为起点。

概述

匈牙利Cellsorter公司推出的单细胞获取平台为获取单细胞提供了完整的解决方案—全自动 Cellsorter单细胞分选系统。

Cellsorter可从血液、骨髓、制备的组织细胞悬浮等液态体系中挑选出感兴趣的单细胞

cellsorter单细胞分选系统以显微镜为基础，采用毛细管技术从少量样本中分离单细胞和稀有细胞的自动细胞分选系统，操作步骤是由软件控制。

整个过程分为三个步骤：

1．细胞识别

2．细胞获取

3．细胞沉积

产品详细描述

facsinapetri细胞分选系统是Cellsoter公司一款主要用于识别、挑取、转移悬液中单细胞或者单一类型细胞。借助高清晰度的CCD 摄像机成像，操作者可直观看到目的细胞，随后通过操控软件控制毛细管高效地完成对悬浮细胞或者是贴壁细胞的挑取及转移。整个过程可视化，操作简单，挑取准确。对于各种类型的单个细胞挑取游刃有余。

该系统通过细胞识别、细胞挑取和细胞转移三个步骤可以实现对悬浮体系中任何单一类型细胞或稀有细胞（如循环肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞以及血液、骨髓中相关细胞等）的分离，细胞可以转移到PCR管等后续实验装置.

该系统以“所见即所得”的方式，几乎涵盖所有的单细胞获取途径，结合单细胞扩增仪和相关耗材可进行下游基因、蛋白水平的研究。

facs in a petri 全自动单细胞分选沉积系统在培养碟中原位自动分选细胞，具有高精度、细胞存活率高、纯度高，而且不破坏细胞组织的特性，是高精准、全自动分选沉积单细胞的*

该系统采用一个微量吸管，可轻松从培养中高精准、全自动分选单个细胞。 CellSorter软件自动扫描载物台上感兴趣的区域，并自动检测荧光的细胞。

几秒钟内该系统就可以看到培养中标明所检测到细胞的地图, 软件计算出访问所有检测到的细胞路径并使用微量吸管把它们分拣出来。

被检测到的细胞从培养皿中通过玻璃微量吸管被自动拾取分拣出来。

您也可以手动检测细胞，手动或自动事后对其进行分选。用户可以评估和修订自动细胞检测.

我们证实了显微镜观测到的无论荧光标记还是未标记的活细胞，在培养皿中都可以可通过计算机系统可视化地被自动识别并拾取由一个计算机控制的微量吸移管固定到所述物镜。

细胞从培养皿中以每秒1细胞的速度可连续分选分拣1000个。

这种方法可以作为流式细胞分选降低到单个细胞具有非常高的选择性，并开启了通过计算机可视化进行在单细胞水平自动操纵单细胞方式。

分选细胞的高分辨率，即两个细胞其中一个可以被选择性地除去之间的小距离是50-70微米，正如我们在特定实验中使用的微量吸吮管。

​CellSorter计算机控制的自动化微吸管系统

该设备将能够自动、轻松、高精准地收集分拣到的单细胞用于进一步培养，克隆，RNA或蛋白质制备以及免疫组化制备后的分选固定细胞。

 传统的荧光活化细胞分选方法（FACS）采用流式细胞术用来分选细胞，是分子基础分选中普遍使用的方法。这种方法只能检测具有荧光活性的细胞，不但细胞存活率低、纯度低，而且极易破坏细胞组织。CellSorter 全自动*，是一款与倒置显微镜配合使用的，用于细胞筛选、提取、沉积的理想设备。该系统可以灵活的与各种类倒置显微镜配合，安装操作也非常简单。如果用户已经拥有自己的显微镜系统，只需购买标准配件就可以将现有的系统升级为一套多功能的细胞分选平台。

  整套系统包含了配有数码相机的倒置显微镜，二维显微镜机动载物台，一维机动显微操纵器，CellSorter 控制单元，和*。我们采用液体静压力方式进行细胞沉积，微量吸液管连接到一个可旋转的显微镜操作臂，可从35mm 的培养皿中提取细胞，并且沉积到玻璃载片或者80PCR管中。

传统的荧光活化细胞分选方法（FACS）采用流式细胞术用来分选细胞，是分子基础分选中普遍使用的方法。
这种方法只能检测具有荧光活性的细胞，不但细胞存活率低、纯度低，而且极易破坏细胞组织。
FACS IN A PETRI 培养碟中原位自动单细胞分选沉积系统，是一款与倒置显微镜配合使用的，用于细胞筛选、提取、沉积的理想设备。
该系统可以灵活的与各种类倒置显微镜配合，安装操作也非常简单。如果用户已经拥有自己的显微镜系统，
只需购买标准配件就可以将现有的系统升级为一套多功能、全自动、高精准、高存活率、高纯度的细胞分选、沉积平台。
系统亮点概述
◇ 可直接从培养皿中进行细胞分选

◇高精准、高纯度、高存活率全自动
◇ 分离粘结活细胞的细胞亚群，分离荧光或者冷光标记
◇ 无标记的和荧光的细胞都可通过软件进行自动识别
◇ 可确保细胞分离后活力，并且可培养
◇ 分选荧光分子探针标记的特定细胞
◇ 单细胞收集进行进一步培养、克隆，RNA 或者蛋白质制备
◇ 免疫制备，进行目标细胞分类
◇ 可对各种粘结细胞进行分类
◇ 细胞筛选前的细胞培养
◇ 一般的分选过程只需几分钟就可完成
◇ 使用安装在显微镜上的荧光滤片可实现多通道监测
◇ 分选速度：1Cell/秒，每一个循环可筛选细胞个数：1~1000
◆ 兼容所有的倒置显微镜
◆ 快速手动调节通过LED 照明光源
◆ 分选针头更换快速、便捷
◆ 可通过连接环完美的安装到显微镜的物镜上
3、适用范围
全自动*使用微量吸液管对细胞进行分选，微量吸液管内孔径范围为50~80um；
可根据客户的应用提供内孔径方案；更小的微移液管可达亚微米级，用于大分子的操纵
在虚拟的培养皿中，荧光细胞被标记为绿色小球，通过微量吸液管对细胞进行提取。
控制台通过物镜环固定在物镜上方，玻璃微量吸液管被固定在控制台中心光轴位置。
微量吸液管顶端通过LED 灯照射，照射光通过微量吸液管直接被引入到物镜。
微量吸液管可通过手动调节弹簧旋钮上下移动到物镜焦点位置。
培养皿可以进行水平移动，微量吸液管上端通过挠性导管连接到*上。
全自动*控制台可通过计算机USB 接口控制流体阀和显微LED 照明光源，
同时也可以自由地控制显微镜荧光快门，并且整合了高速控制阀实现流体快速、精密控制。
4、参数
2D 自动控制显微镜平台和自动聚焦单元：SCAN IM 130 x 100mm（扫描范围）MA-42 变速控制单元
Tango 3 PCI-S Controller 三轴控制器
1D 自动显微操纵单元
12 位冷却型荧光CCD 相机：分辨率1600X1200 pixels
*：注射率0.73ul/hr (1cc)到2100ml/hr (60cc)
Dell 工作站，用于控制*系统
高分辨显示积功能：
◆ 单细胞输器，全高清分辨（1920×1080）
自动单细胞沉积功能：
◆ 单细胞输送到达每一个PCR 管
◆ 滴液体积小于1ul
◆ 一个循环可装满80 个PCR 管
◆ 每个Cell 沉积时间15~20 秒
◆ 可在一个玻璃盖玻片上原位测试单个细胞沉积
◆ 分选速度：1Cell/秒，每一个循环可筛选细胞个数：1~1000

5、使用方法
全自动*配备高精度微移液管支架，控制台始终保证微量吸液管位于视场的正中心，
并且微移液管控制台可非常容易地安装在物镜上，同时软件可对移液管的位置进行偏差校准。
微移液管的可通过转动控制台的旋钮进行手动聚焦，且微移液管的可在显微镜中非常容易的被观察到，
同时显微镜的图像可跟进调整；玻璃微移液管更换非常便捷，当更换培养皿时简单地取下来分选针头即可。
该系统采用液体静压力方式进行细胞沉积，微量吸液管连接到一个可旋转的显微镜操作臂,
可从35mm的培养皿中提取细胞，并且沉积到玻璃载片或者PCR管中。

6、系统组成部分

1）自动显微移液管控制和聚焦单元及样品台
2）相关附件和液体管(5 个微移液管，用于单个细胞操控)
3）2D 自动控制显微镜平台和自动聚焦单元
4）1D 自动显微操纵单元
5）12 位冷却型荧光CCD 相机：
6）*
7）预装基于Windows操作系统的Cellsort分选分析软件系统的计算机以及高分辨显示器