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冷冻切片机操作方法

时间:2014-09-17      阅读:1859

  冷冻切片机操作方法
  
  ①取材。
  
  ②取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上,冰冻。
  
  ③将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。
  
  ④调好欲切的厚度,一般在5~10um间。
  
  ⑤调好防卷板。制作冰冻切片,关键在于防卷板的调节上,这就要求操作者要细心,准确地将其调较好,调校至适当的位置。切片时,切出的切片能在*时间顺利地通过刀防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一载玻片,将其附贴上即可。
  
  注意事项:
  
  ①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净,需经常用毛笔挑除切片残余
  
  和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方,如果有残余的包埋剂粘于刀或板上,将会破坏甚至撕裂切片,便切片不能完整切出。
  
  ②放置组织冰冻前,应视组织的形状及走势来放置,所谓“砍柴看柴势”,切片
  
  也是如此,如果胡乱放置,就不能收到很好的效果。③组织块不须经各种固定液固定。
  
  ④当切片时,如果发现冰冻过度时,可将冰冻的组织连同支承器取出来,在室
  
  温停留片刻,再行切片,或者用口中哈气,或者用大拇指按压组织块,以此来软化组织,再行切片。另者,调高冰冻点。
  
  ⑤用于附贴切片的载玻片,不能存放于冷冻处,于室温存放即可。因为当附贴
  
  切片时,从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差,当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时,由于两种物质间温度的差别,当它们碰撞在一起时,分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力,使切片与载玻片牢固地附贴在一起。如果使用冷藏的载玻片来附贴切片,由于温度相同,没有发生上述的现象。
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