真正的解决方案----悬浮细胞/微珠高通量筛选
高内涵筛选通过提供丰富的数据促进药物的开发，成为药物研发过程的常规流程。然而高内涵筛选仅仅局限于贴壁细胞，无法触及到更多的重要研究领域，美国InliCyt推出iQue Screener筛选系统可分析悬浮细胞和微珠，为当今的筛选实验提供快速的高内涵的实验数据

• 通过对悬浮细胞进行高通量的功能性筛选，增加表型筛选实验中小分子药物开发的效率；
• 通过同时获取抗原结合和交叉反应的数据，从抗体开发研究中获得更好的杂交瘤信息，并且筛选目标都保持在它们的自然构型状态中。
• 确保更多的体外毒性的预测结果可通过全自动的、多终点的实验设计得到，这种实验每秒可分析上千个独立细胞的健康特性。

 整合的解决方案

*整合仪器、软件和试剂盒的筛选解决方案，使研究者可以用筛选的速度和效率分析悬浮细胞。
iQue^TM Screener如何运行
iQue^TM筛选系统是高通量的、基于流式细胞仪的筛选平台，运送一个连续的样本流给检测器，后者从单个的细胞中收集多重读数。这种*的进样方法可将细胞或其他内含物以连续的、空气间隔的方法，从微孔板中输送到流式细胞仪中，以确保准确的跟踪，并将交叉污染zui小化。zui终的检测结果只需要几分钟，而不是几个小时，并能以易于解读的热图（heat map）形式形成基于微孔板的实验结果。


iQue^TM Screener的特点
更高的实验效率

• 在几天内筛选您的文库，而不是几个月
• 进样体积可低至1µL，减少试剂的成本
• 可在3min内运行一块96孔板，在12min内运行一块384孔板
• 可以与机械臂和其他自动工作单元相整合
• 兼容细胞、微珠和它们的混合物

更多的生理相关性

• 可对不同细胞的混合物进行分析，读取单个细胞数据
• 可筛选悬浮细胞，并筛选自然构象的目标物
• 用四个荧光通道收集多重读数
• 可检测非标记目标物的尺寸和粒度

 
更稳定的实验结果
 

• 6个数量级的检测范围可提供灵敏和可靠的实验结果
• 10,000个独立的细胞，可得到每孔内的更好的统计数据

 
更易于使用

• 完整的工作流程的支持
• 分析实时动态
• 生成即时报告
• 即插即用的应用特异性试剂盒

超高通量，您强劲的帮手
应用
抗体开发（Antibody Discovery）

• 杂交瘤筛选（Hybridoma Screening）
• 决定种系间的交叉反应性（Determining Species Cross-Reactivity）
• 评估抗体分泌细胞系的生产效率（Assessing Productivity of Antibody-Secreting Cell Lines）
• 筛选人生殖细胞IgG库（Screening a Human Germline IgG Library）

体外毒性实验（In Vitro Toxicology）

• 微核诱导的定量（Quantification of Micronucleus Induction）
• 凋亡事件的检测（Detection of Apoptotic Events）

表型筛选（Phenotypic Screening）

• 对诱导骨髓祖细胞分化的化合物的筛选（Screening for Compounds that Induce Myeloid Progenitor Cell Differentiation）
• 多重细胞系的GFP表达筛选（GFP Expression Screening in Multiple Cell Lines） 
   

抗体开发
InliCyt的筛选系统结合MultiCyt试剂盒，可以同时检测多个终点，有助于对克隆库里的抗体进行高通量的鉴别和描述。此外，应用悬浮细胞进行分析的能力，使目标物质能在它们的自然构型下进行筛选，从而能获得更好的杂交瘤的信息。 
杂交瘤筛选
InliCyt的筛选系统和MultiCyt Hybridoma Screening Kit试剂盒的结合使用，可以优化整个实验流程。这种混合然后检测的实验方法消除了初筛中现有的很多步骤，能同时评估抗原的结合和交叉反应特性。

目标细胞（未标记）和对照细胞（钙黄绿素标记）混合在一起并分布在微孔板中。然后加入杂交瘤库中的被测抗体，和带红色荧光的检测抗体一起孵育。然后用iQue分析微孔板，同时检测杂交瘤悬浮液中的抗体和目标细胞、对照细胞群体的结合。和对照细胞的结合表现了交叉反应性和非特异性结合性，为每个孔的实验提供了内部对照。

未处理的细胞的实验使抗体筛选可以在有构象的表位上进行，这在ELISA和其他纯化蛋白质实验中是无法做到的，因为抗原在纯化的过程中会经常失去折叠而失活。
决定种系间的交叉反应性
InliCyt筛选系统的多重功能可以将抗体的跨种系反应活性融入到研发的筛选流程中。MultiCyt Cell Encoder Kit试剂盒允许每孔同时检测五种细胞系。该实验能容易地鉴定出能与多种种系的目标抗原发生交叉反应的高度合适的克隆，这些克隆就是临床前研究的更强有力的候选物。

亲代细胞系和经过基因工程改造的能表达小鼠、大鼠、猕猴和人类受体的细胞系被分别标记并混合在一个样本中。其中，未转染的亲代细胞系作为每个样本的阴性结合对照。样本被加入96孔微孔板进行抗体结合实验，然后依次加入初筛检测抗体和二筛检测抗体。实验结束后，每个样本的细胞系得到确认，并被单独评估，生成结合亲和力曲线。该实验4块96孔微孔板中进行，得到了4种不同实验条件下的12种抗体，8个剂量的曲线，所有实验在1小时内完成。
评估抗体分泌细胞系的生产效率
InliCyt筛选系统的多重功能和Multi-Cyt IgG Count and Capture Kit试剂盒合用，可提高成功确认高生产率细胞系的机会。在单个实验中，通过同时检测分泌的抗体量、细胞数目和细胞活性获得单个细胞的抗体水平。

样本中分泌的抗体结合到捕获微珠上，被荧光标记的检测试剂所检测。加入一种特异性标记非活性细胞的染料，以确定活性细胞和非活性细胞的比值。分析微孔板，每个样本同时记录三个读数：分泌的抗体的水平，总细胞数目和非活性细胞的百分比。这样就能容易的算出每个细胞分泌的抗体水平。
筛选人生殖细胞IgG库
用InliCyt筛选系统可以进行筛选方法的开发，这种筛选方法适合细胞表面表达的抗原，并能检测多重终点。Fabrus Inc.公司（San Diego, California）开发了一个人生殖细胞Fab库，并进行了大约10,000个IgG对哺乳动物细胞表面目标抗原的直接筛选。其使用HTFC筛选系统进行，使目标IgG可以在脂质细胞膜表面的天然环境中进行筛选。

细胞用GFP和目标抗原进行短暂共转染，然后每一个群组，表达三个不同目标抗原中的一个，用一定数量的钙黄绿素作为细胞编码染料进行标记。转染好的标记细胞被物理混合成单个样本，分装在微孔板上，进行针对这些样本的IgG库的筛选。GFP的信号用来确认细胞是否表达了抗原，细胞编码染料使三种细胞能同时进行实验，以确认和分析每一个目标物。GFP阴性的细胞作为不表达目标抗原的内部阴性对照。结合在细胞上的IgG用荧光进行二次检测，并且对每一个染色的群组进行了评估。
体外毒性实验
IntlliCyt的筛选系统可在1秒钟内分析溶液中几千个细胞的健康性能，使用MultiCyt试剂盒全自动的简化工作流程为药物开发提供早期的有关基因毒性的筛选途径。
微核诱导的定量
在InliCyt的筛选系统上进行体外微核实验，用Litron（罗切斯特，纽约）的体外MicroFlow Kit试剂盒可以可靠地检测基因毒性化合物引起的悬浮细胞和贴壁细胞的微核的改变。384微孔板结合自动化分析时，原来需要16个小时才能完成的实验现在只要30分钟就能完成，使微核诱导实验能达到筛选级别的高通量。
检测凋亡事件
InliCyt的系统、软件和应用试剂盒被优化和确认来对多重凋亡终点进行识别和特征描述。同时或以不同的组合方式监控Caspase 3，Annexin V，线粒体去极化，细胞活性和细胞数目等指标，以得到各终点间的更好的相关性和更完整的凋亡进程图。复杂的细胞混合物也能被监控，以获得不同的差异效率。

表型筛选
对诱导骨髓祖细胞分化的化合物的筛选
InliCyt筛选系统可以筛选克服原骨髓祖细胞的分化停滞的生物相关化合物，并能容易地确定能刺激干细胞分化的化合物，同时消除显示细胞毒性的化合物。

细胞系来源于基因改造小鼠，该小鼠在溶菌酶启动子的控制下表达GFP：分化的细胞表达GFP（GFP+），未分化的细胞不表达GFP（GFP-）。同时筛选350,000个化合物作用下的细胞活性、细胞数目和绿色荧光。通过测量每个孔的前向散射，侧向散射和细胞数目，无须活性染料就可确定毒性化合物，并同时确定GFP+。微孔板热图（Plate heat maps）能同时研究能诱导分化的化合物（用GFP阳性的细胞表示）（GFP+ plate）、细胞毒性（用细胞的损失来表示）和包含多重参数的比值（创造出来用于设定筛选标准）。
多重细胞系的GFP表达筛选
和许多已知的GFP模型相兼容，InliCyt的筛选系统能在悬浮和贴壁细胞上进行高通量群组的表型分析。可以确定和定量暂时转染的细胞群组中的表达GFP的细胞。

简化群组的表型筛选流程使多重终点能被连续的分析，得到更多数据（如：活细胞的GFP信号），或作为单一的终点被平行分析（细胞存活百分比和细胞表达百分比）。

对微孔板的每个样本，多重数据可产生更加生物相关的信息以进行数据评估。Lipofectamine（LF2K）转染试剂对HepG2细胞的三倍（triplicate）实验。