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无菌试验培养基使用方法及其特点

时间:2012-08-16      阅读:489

无菌培养基品种

  • 一  硫乙醇酸盐培养基
  • 二  酪胨琼脂培养基
  • 三  葡萄糖蛋白胨汤培养基(改良马丁肉汤培养基)
  • 无菌检验培养基概述
    • 无菌检验培养基是生物制品检验的基础物质也是常用的物质,质量稳定性直接关系到疫苗的质量。
    • 无菌检验培养基根据不同制品还可能和其它培养基共同使用。这都很正常。
    • 无菌检验培养基标准比较完善。

硫乙醇酸盐培养基配方

  •    酪胨                                      15g
  •    葡萄糖                                     5g
  •    L-半胱盐酸盐                             0.5g
  •    酵母粉                                     5g                 
  •    硫乙醇酸钠                               0.5g
  •    琼脂                                     0.7g
  •    氯化钠                                   2.5g
  •    刃天青                                 0.001g

硫乙醇酸盐培养基配方特点

  • 酪胨、L-半胱盐酸盐、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
  • 葡萄糖为微生物提供碳源。
  • 氯化钠等为微生物提供无机盐保证渗透压平衡的目的。
  • 琼脂加量比较少,因此此培养基呈流体状。目的是:1.观察方便。2.控制氧气进入速度。
  • 硫代乙醇酸钠是氧化剂,和氧气反应有利于创造厌氧环境。
  • 刃天青加入为了观察氧气情况。

硫乙醇酸盐培养基使用特点

  • 此培养基可用于需氧和厌氧菌检验。
  • 含琼脂的培养基用于血清制品及澄清度较好的疫苗无菌检验。
  • 不含琼脂硫代乙醇酸盐培养基用于浑浊制品检测。
  • 红色层不超过1/3,如超过需要加热驱氧,但不得重复驱氧。

硫乙醇酸盐培养基使用常见问题

  • 透明度不好,有漂浮物或者沉淀物,如沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。如为漂浮物可能和琼脂有关。
  • 红色层不明显,主要和刃天青品种加量有关。现在有的培养基制作后为蓝色层。这也是正常情况。
  • 灵敏度的问题可能和菌种传代、稀释有关。
  • 灭菌后放置出现褐色物质,主要和灭菌方式有关。

酪胨琼脂培养基配方

  •    酪胨                                     15g
  •    葡萄糖                                    5g
  •    L-半胱盐酸盐                            0.5g
  •    酵母粉                                    5g               
  •    琼脂                                     12g
  •    氯化钠                                  2.5g

酪胨琼脂培养基配方特点

  • 酪胨、L-半胱盐酸盐、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
  • 葡萄糖为微生物提供碳源。
  • 氯化钠等为微生物提供无机盐保证渗透压平衡的目的。
  • 琼脂加量加大,制成固体培养基。
  • 不需要加硫代乙醇酸钠。
  • 不需要加刃天青。

酪胨琼脂培养基使用特点

  • 此培养基只能用于需氧菌检验。
  • 现在有些细菌疫苗为活疫苗,此培养基有利于纯粹检测。
  • 不加硫代乙醇酸钠,不需要驱氧。
  • 刃天青指示用,也不需要加。

酪胨琼脂养基使用常见问题

  • 透明度不好,有沉淀物。沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。
  • 强度过软、过硬都不好。这主要和琼脂品种加量有关。需要提前做强度试验。
  • 复溶性不好。这主要和琼脂种类有关。

改良马丁肉汤培养基配方

  •    蛋白胨                                    20g
  •    葡萄糖                                     5g
  •    酵母粉                                    2.5g               
  •    *                                 1g
  •    *                                    0.5g
  •    琼脂                                      0.3g

改良马丁肉汤培养基配方特点

  • 蛋白胨、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
  • 葡萄糖为微生物提供碳源。
  • *及*有利于真菌细菌繁殖。
  • 琼脂加入便于观察。

改良马丁肉汤培养基使用特点

  • 此培养基只能用于真菌及霉菌检验。
  • 培养是温度为25℃和37 ℃两组培养。
  • 加琼脂有利于观察。

改良马丁肉汤培养基使用常见问题

  • 透明度不好,有沉淀物。沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。
  • 透明度还有可能和磷酸盐有关。
  • 生长不好,有时和水的pH值有关。因为此培养基为自然pH,工艺用水pH应在5.5-6.5之间比较合适。
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