细胞凋亡荧光检测试剂盒(NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis

细胞凋亡荧光检测试剂盒(NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis

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2018-05-31 22:55:09
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产品简介

该试剂盒包含两种主要的染料NucViewTM 488 caspase-3 底物和MitoViewTM 633线粒体染料,可以非常方便的同时显示细胞凋亡中Caspase-3的活力以及线粒体膜电位的变化。方法可以选择流式细胞术或者荧光显微镜,两种染料的光谱分离使得荧光的重叠现象降为Z小。

详细介绍

该试剂盒包含两种主要的染料NucViewTM 488 caspase-3 底物和MitoViewTM  633线粒体染料,可以非常方便的同时显示细胞凋亡中Caspase-3的活力以及线粒体膜电位的变化。方法可以选择流式细胞术或者荧光显微镜,两种染料的光谱分离使得荧光的重叠现象降为zui小。
试剂盒原理:
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活。活化的Caspase-3能够特异切割底物DEVD-NucView 488。根据这一特点,Biotium 将一段带有大量负电荷的DEVD肽连接到一种能和DNA结合的染料上。底物本身不能产生荧光,但是这种底物可以快速的穿过细胞膜进入细胞质并在这里被活化的Caspase-3剪切,从而释放出和DNA有高亲和力的染料,释放出来的染料迁移进入细胞核并把细胞核染成亮绿色。根据释放的荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。从这里我们可以得出:这个荧光底物不同于传统的底物,它实现活细胞 Caspase-3 活性检测的同时染色细胞核DNA,具有典型的双功能性。
线粒体跨膜电位的降低是细胞凋亡早期的不可逆事件,引起一系列线粒体相关变化。MitoViewTM 633是一种远红外线粒体荧光染料(一种亲脂性阳离子化合物),在正常细胞中依据线粒体膜电位(外正内负)的存在,逐渐扩散进质膜并沉积在线粒体内,在激发光下放出荧光,可以非常方便地使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜来观察线粒体的形态和移动的变化情形。例如下图,活的Hela细胞用MitoViewTM  633染色结果

HeLa cells were stained with MitoView 633 for 30 min, rinsed in PBS, and fluorescence was visualized on an Olympus epifluorescence microscope using a Cy5 filter. Image is a representative live HeLa cell stained with MitoView 633.
 
但是,在开始凋亡细胞中,线粒体膜电位的降低,MitoViewTM  633染料不会(或少量)进入线粒体,这样,开始凋亡细胞相对于健康活细胞来说,被MitoViewTM  633染色很少或者没有,与caspase-3底物DEVD-NucView 488形成一种负相关的关系,如下图所示:

Microscopy of Jurkat cells stained with NucViewTM 488 and MitoViewTM 633. Healthy cells are strongly stained with MitoViewTM  633 (red) while the apoptotic cell with fragmented nucleus is strongly stained with NucViewTM  488 (green). There is an inverse correlation between these probes.
某种情况下,寻找NucViewTM  488 和MitoViewTM  633荧光染料合适的工作液浓度非常重要,有一些高浓度情况下,这些染料探针有可能对细胞的其他结构进行着色。
 
试剂盒内容物:
1 vial (100 μL); NucViewTM  488 Caspase-3 substrate, 200X in DMSO
1 vial (100 μL); MitoViewTM  633 Mitochondrial Dye, 200X in DMSO
 
货号
产品名称
规格
30062
NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Kit
细胞凋亡荧光检测试剂盒
100次
 
其它细胞凋亡荧光检测产品:
货号
产品名称
规格
70055
MitoView 633
20 X 50ug
10400
NucViewTM 488 Caspase-3 Enzyme Substrate 1mM in 1X PBS
100 uL
30001
JC-1 mitochondrial membrane potential detection kit
100 assays
30008-1
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kit
30008-2
Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric & Colorimetric Assay Kit (100 assays)
kit
30009-1
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30009-2
Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit
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30009-3
Caspase-3 DEVD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit
100 mL
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30011-2
Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric and Colorimetric Assay Kit
100 assays
30012-1
Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit
1 mL
30012-2
Caspase-8 IETD-R110 Fluorometric HTS Assay Kit
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30012-3
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100 mL
30017
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30018
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50 assays
30019
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30029
NucViewTM 488 Caspase-3 Assay Kit for live cells
活细胞caspase-3荧光检测试剂盒
100 – 500A
30030
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双凋亡检测试剂盒
50 - 250 assays
30060
CF488A Annexin V and 7-AAD Apoptosis Kit
细胞凋亡荧光检测试剂盒
100 assays
30061
CF488A Annexin V and PI Apoptosis Kit
细胞凋亡荧光检测试剂盒
100 assays
70054
MitoView Green
20X50ug
 

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