小鼠组织相容性复合物(MHC)ELISA试剂盒

小鼠组织相容性复合物(MHC)ELISA试剂盒

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2016-01-02 09:10:36
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产品简介

货号:SU12015,产品名称:小鼠组织相容性复合物(MHC)ELISA试剂盒
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详细介绍

  SU12015小鼠组织相容性复合物(MHC)ELISA试剂盒的详细资料:

 

货号:SU12015,产品名称:小鼠组织相容性复合物(MHC)ELISA试剂盒

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ELISA试剂盒标本的采集及保存
 
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 样本处理:血清或血浆标本*稀释5,000倍。
注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测
 
操作步骤
 
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。
 
试剂盒组成

试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
 
封板膜
2片(48)
2片(96)
 
密封袋
1个
1个
 
酶标包被板
1×48
1×96
2-8保存
标准品:13.5U/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8保存
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8保存
酶标试剂
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
样品稀释液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
显色剂A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
显色剂B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8保存
终止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8保存
20倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
30ml×1瓶
2-8保存

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