定氮仪分析我国蛋白质的提取影响因素
,这个反应进行得比较缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点,并加入硫酸铜作为催化剂,以促进反应的进行。消化完成后,在凯氏定氮仪中加入浓碱,可使消化液中的硫酸铵分解,游离出氨,借助水蒸汽蒸馏法,将产生的氨蒸馏到一定量、一定浓度的硼酸溶液中,硼酸吸收氨后,氨与溶液中氢离子结合,使溶液中的氢离子浓度降低,指示剂颜色改变,然后用标准无机盐酸滴定,直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止。这个过程一般是在定氮仪中需要使用到
NaCl浓度对蛋白质提取率的影响由图1可知,随着NaCl浓度的增大,蛋白质的提取率也逐渐增大。当NaCl浓度为1·5mol·L-1时,蛋白质的提取率zui高。当NaCl浓度继续增加时提取率开始下降,因此NaCl浓度选择在1·5mol·L-1较为适宜。蛋白质含量的测定可以使用自动定氮仪进行快速的测定分析
提取温度对蛋白质提取率的影响由图2可知,蛋白的提取率随着温度的提高而增加,50~60℃的提取率zui高,温度再提高,提取率有下降的趋势,在60℃以上,蛋白变性明显,氮的可溶性降低了。因此温度选择在60℃较为适宜。
提取时间对蛋白质提取率的影响由图3可知,当提取时间由0·5h增加到1·5h时,蛋白质的提取率显著增加,提取时间为1·5h时,蛋白得率zui高,时间再延长,蛋白质的提取率反而有下降的趋势,这可能是因为提取时间过长,部分蛋白质发生了变性和凝聚反应,从而导致蛋白质提取率的下降。因此,提取时间选择1·5h比较合适。
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