人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒*

人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒*

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具体成交价以合同协议为准
2016-07-15 04:07:21
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产品简介

人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒* ,实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围,更多资讯详情咨询我公司。

详细介绍

 

人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒*实验步骤(建议方案):

石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度

1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;

2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次

10 min;

3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%

乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;

4.抗原修复: 根据抗体说明书*方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温

度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×

2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,

直接进入第5 步封闭。

5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;

6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;

7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);

8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;

9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的*化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育

30 min;

10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);

11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;

12.加HRP-SA: 滴加用试剂C 稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),37

℃湿盒中孵育30 min;

13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);

14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;

15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;

16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;

17.观察成像: 显微镜下观察成像。

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人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒*注意事项:

1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致

结晶或抗原封闭。

2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使

用。

3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。

4. 封片前一定要换用TBS 充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会

影响结果观察。

5. 如须复染细胞核,则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封

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