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小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)免疫组化试剂盒
面议小鼠5核苷酸酶(5-NT)免疫组化试剂盒
面议小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)免疫组化试剂盒
面议小鼠L苯*解氨酶(PAL)免疫组化试剂盒
面议小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体(sCD30L)免疫组化试剂盒
面议小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)免疫组化试剂盒
面议小鼠α2纤溶酶抑制物(α2-PI)免疫组化试剂盒
面议小鼠泛素蛋白(Ub)免疫组化试剂盒
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面议小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)免疫组化试剂盒
面议小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)免疫组化试剂盒
面议小鼠α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)免疫组化试剂盒
面议鸡白介素17(IL-17)免疫组化试剂盒 ,(更多资讯说明书价格等请详情我公司)实验步骤建议方案:
石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书*方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的*化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育
30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用试剂C 稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),37
℃湿盒中孵育30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
鸡白介素17(IL-17)免疫组化试剂盒 ,注意事项:
1. 修复后缓冲液须自然冷却,自来水冲洗后方能把切片取出,骤冷有可能导致
结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到,用过的柠檬酸缓冲液不能反复使
用。
3. 若试剂为微量浓缩液,用前应低速离心,将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS 充分洗涤,以便洗去组织上残留的Tween 20,否则会
影响结果观察。
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